[发明专利]一种SIGLEC15基因人源化动物模型的构建方法及应用

权利要求书

1.一种SIGLEC15基因人源化非人动物模型的构建方法，所述的构建方法包括使用靶向SIGLEC15基因的gRNA和同源重组载体进行构建，其特征在于，所述靶向SIGLEC15基因的gRNA包括靶向5’端的gRNA和靶向3’端的gRNA，所述靶向5’端的gRNA识别的靶位点序列如SEQ IDNO:12所示，所述靶向3’端的gRNA识别的靶位点序列如SEQ ID NO:26所示，所述同源重组载体包括5’同源臂、人SIGLEC15基因片段、3’同源臂，所述人SIGLEC15基因片段编码的蛋白序列如SEQ ID NO:2所示，所述的非人动物体内表达人SIGLEC15基因编码的蛋白。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述同源重组载体包括的5’同源臂的序列如SEQ ID NO:6所示，所述同源重组载体包括的3’同源臂的序列如SEQ ID NO:7所示。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述人SIGLEC15基因部分破坏内源SIGLEC15基因的编码框，使内源的SIGLEC15基因不表达。

4.根据权利要求1-3任一权利要求所述的构建方法，其特征在于，所述非人动物为小鼠。

5.根据权利要求4所述的构建方法，所述人SIGLEC15基因片段的序列如SEQ ID NO:5所示。

6.一种用于构建SIGLEC15基因人源化非人动物模型的同源重组载体，其特征在于，所述同源重组载体包括5’同源臂、人SIGLEC15基因片段、3’同源臂，所述同源重组载体包括的5’同源臂的序列如SEQ ID NO:6所示，所述同源重组载体包括的3’同源臂的序列如SEQ IDNO:7所示。

7.根据权利要求6所述的同源重组载体，其特征在于，所述人SIGLEC15基因片段编码的蛋白序列如SEQ ID NO:2所示。

8.一种用于构建SIGLEC15基因人源化非人动物模型的gRNA，包括靶向5’端的gRNA和靶向3’端的gRNA, 其特征在于，所述靶向5’端的gRNA识别的靶位点序列如SEQ ID NO:12所示，所述靶向3’端的gRNA识别的靶位点序列如SEQ ID NO:26所示。

9.一种用于构建SIGLEC15基因人源化非人动物模型的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求6-7任一所述的同源重组载体和权利要求8所述的gRNA，以及Cas9 mRNA。

10.权利要求1-5任一所述的构建方法获得的SIGLEC15基因人源化的非人动物在SIGLEC15基因或蛋白相关研究中的应用，所述应用不是疾病的诊断和治疗方法，所述的应用包括：

a）涉及人类细胞的免疫过程的产品开发，制造或筛选人类抗体中的应用；

b）作为药理学、免疫学、微生物学和医学研究的模型系统中的应用；

c）涉及人类细胞的免疫过程的生产，利用动物实验疾病模型用于病原学研究中的应用；

d）在体内研究人SIGLEC15信号通路调节剂的筛选；或者

e）研究SIGLEC15基因功能，研究人SIGLEC15抗体，研究针对人SIGLEC15靶位点的药物、药效，研究免疫相关疾病药物以及抗肿瘤或炎症药物方面的用途。