[发明专利]对神经细胞进行活细胞检验的方法以及药物筛选方法在审
申请号: | 202111558504.1 | 申请日: | 2021-12-17 |
公开(公告)号: | CN114480552A | 公开(公告)日: | 2022-05-13 |
发明(设计)人: | 贾雅丽;岳文;裴雪涛;王艾琳;王超 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;G01N1/30 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 赵静 |
地址: | 100850*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 神经细胞 进行 细胞 检验 方法 以及 药物 筛选 | ||
1.一种对神经细胞进行活细胞检验的方法,其特征在于,包括:
(1)利用DPBS溶液,将神经细胞进行清洗,以便去除死细胞;
(2)利用Hoechst,对所述神经细胞进行细胞核染色;
(3)利用DPBS溶液,对经过细胞核染色的所述神经细胞进行清洗;
(4)利用钙黄绿素,对所述神经细胞进行细胞质染色,以便得到核质着色的神经细胞;
(5)采用高内涵分析系统,对所述核质着色的神经细胞进行神经细胞分析,以便确定所述神经细胞的活细胞特征。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述活细胞特征包括选自平均轴突长度、平均分支数、平均树突长度的至少之一。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述神经细胞设置在多孔板中。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述高内涵分析系统,在所述多孔板的每个孔中拍摄至少40个视野,例如49个视野。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述神经细胞为SH-SY5Y细胞。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述神经细胞经过冈田酸处理。
7.一种筛选药物的方法,所述药物用于治疗或者预防神经损伤,其特征在于,所述方法包括:
利用冈田酸处理SH-SY5Y细胞,得到神经细胞损伤模型;
利用候选试剂对所述神经细胞损伤模型进行处理;
并且在所述处理前后,分别通过权利要求1~6任一项所述的方法,确定所述神经细胞损伤模型的活细胞特征;
根据所述处理前后,所述活细胞特征的差异,确定所述候选试剂是否可以用于治疗或者预防所述神经损伤。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述候选试剂为间充质干细胞亚群。
9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述神经细胞损伤包括树突轴突缩短、胞体肿胀和细胞分支数减少的至少之一。
10.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述神经损伤与tau蛋白过度磷酸化有关。
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