[发明专利]一种检测奇异变形杆菌的LAMP检测试剂盒在审
| 申请号： | 202111526141.3 | 申请日： | 2021-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN114214440A | 公开（公告）日： | 2022-03-22 |
| 发明（设计）人： | 张璜;余嘉明;高金艳;常彦磊;林雪金;徐子杰;林梦蝶 | 申请（专利权）人： | 广州双螺旋基因技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/37 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 段卉 |
| 地址： | 510000 广东省广州市黄*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 奇异 变形 杆菌 lamp 试剂盒 | ||
1.一组检测奇异变形杆菌的引物组，其特征在于，所述引物组由一对外引物、一对内引物和一条环引物组成，所述外引物中正向置换引物F3的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，反向置换引物B3的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，所述内引物中正向内引物FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，反向内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示，所述环引物LB的核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示。
2.权利要求1所述的检测奇异变形杆菌的引物组在制备检测奇异变形杆菌检测试剂盒中的应用。
3.一种检测奇异变形杆菌的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒包含权利要求1所述的引物组。
4.根据权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中还包含DNA聚合酶、LAMP反应液、奇异变形杆菌阳性对照和阴性对照。
5.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中DNA聚合酶为BstDNA聚合酶。
6.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中LAMP反应液含有MgSO4、甜菜碱、ThermoPol缓冲液、dNTPs、SYTO-9和Bst DNA聚合酶。
7.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中奇异变形杆菌阳性对照为含奇异变形杆菌hns基因片段的T载体，所述hns基因片段的核苷酸序列如SEQ IDNO:18所示，阴性对照为超纯水。
8.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒的反应体系中，权利要求1所述的外引物、内引物和环引物之间的摩尔比为：1～2：4～8：2～4。
9.根据权利要求8所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒的反应体系为：7.8～8.2MgSO4、0.8～1.2mol/L甜菜碱、权利要求1所述的引物F3和引物B3分别为0.1～0.3μmol/L、权利要求1所述的引物FIP和引物BIP分别为1.4～1.8μmol/L、权利要求1所述的引物LB为0.6～1μmol/L、2.5μL10×ThermoPol缓冲液、1.4～1.8mmol/L dNTPs、6～10U Bst DNA聚合酶、0.8～1.2μmol/L SYTO-9和1.8～2μL模板，用超纯水补足至25μL。
10.根据权利要求9所述的检测试剂盒，其特征在于，所述反应体系的反应条件为63～65℃反应30～60min。
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