[发明专利]泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶融合蛋白、多克隆抗体及其制备方法和应用在审
申请号: | 202111500821.8 | 申请日: | 2021-12-09 |
公开(公告)号: | CN113943719A | 公开(公告)日: | 2022-01-18 |
发明(设计)人: | 宋传生;王亚丽;王俊刚;康晓飞;周天华;田福忠;樊庆忠 | 申请(专利权)人: | 菏泽学院 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C07K19/00;C12N15/70;C12N15/62;C07K16/40;G01N33/569;G01N33/573 |
代理公司: | 嘉兴华申知识产权代理事务所(普通合伙) 33454 | 代理人: | 徐桂红 |
地址: | 274015 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 泡桐 丛枝植 原体 胸苷酸 合成 融合 蛋白 克隆 抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示。
2.权利要求1所述的泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶融合蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将所述的泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶的基因重组于pET-28a载体的BamHI酶切位点和XhoI酶切位点之间,得到重组载体;
(2)将步骤(1)制备的重组载体转入菌株Escherichia coli BL21(DE3)中,得到重组菌株;
(3)培养步骤(2)制备的重组菌株,通过IPTG诱导表达;
(4)目标蛋白的检测与纯化。
3.根据权利要求2所述的泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶融合蛋白的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述的泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶基因的ORF核苷酸序列如SEQ IDNO.3和SEQ ID NO.6所示。
4.根据权利要求2所述的泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶融合蛋白的制备方法,其特征在于,用于构建步骤(1)中所述的重组载体的正向引物为thyAF-BamHI,其核苷酸序列如SEQID NO.7所示,反向引物为thyAR-XhoI,其核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。
5.泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶多克隆抗体,其特征在于,是以权利要求1所述的融合蛋白为免疫原免疫兔获得。
6.根据权利要求5所述的泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶多克隆抗体,其特征在于,所述的免疫原与佐剂混合乳化后进行免疫。
7.权利要求5或6所述的泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶多克隆抗体在泡桐丛枝植原体检测或植原体胸苷酸合成酶检测中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述检测的方法为蛋白质免疫印记法、免疫荧光显微镜法或免疫电子显微镜法。
9.一种泡桐丛枝植原体或植原体胸苷酸合成酶的检测产品,其特征在于,所述的产品含有权利要求5或6所述的泡桐丛枝植原体胸苷酸合成酶多克隆抗体。
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