[发明专利]一种抗精神病药物个体化检测方法

权利要求书

1.一种抗精神病药物个体化检测方法，其特征在于：

步骤一，采集患者血液样本，采用核酸提取试剂盒进行核酸提取；

步骤二，对提取的核酸样本进行基因测试分析，取得基因检测分析结果；

步骤三，基于基因检测结果，结合询证医学证据，推荐适合的抗精神病药物；

步骤四，采集患者下次给药前血液样本，采用高效液相色谱法测定药物谷浓度；

步骤五，个体化给药步骤包括：根据患者基因型确定给药选择；测定药物谷浓度；判断药物谷浓度是否在安全范围；基于药物谷浓度结果调整给药剂量；多次调整使患者达到最佳剂量，进而实现个体化药物治疗。

2.如权利要求1所述抗精神病药物个体化检测方法，其特征在于，步骤一中，核酸提取步骤包括：

(1)收集血样，将血清弃去，取约0.5ml血凝块置入液化柱CX1中，12000rpm高速离心1分钟，将收集在1.5ml微型管中的滤液加入约2倍体积的细胞裂解液(CL)，振荡混匀后10000rpm高速离心1分钟，弃去上清液，向留下的细胞核沉淀加入200μl缓冲液(GS)，涡旋混匀，以备下一步操作；

(2)向步骤1备好的细胞核沉淀液加入30μl配置好的EDB溶液，轻柔混匀，取300μl LDB溶液加入后迅速上下振荡5次，涡旋振荡1分钟；

(3)将步骤2液体短暂低速离心(3000转/分钟)，56℃温浴3分钟；

(4)加入300μl无水乙醇，涡旋振荡30秒，获裂解产物，短暂低速离心(3000rpm)；

(5)将上述全部裂解产物转移至离心吸附柱(CA)中，置于核酸提取仪，采用转动增压的方式，CA的多孔亲水膜选择性吸附核酸，过滤出的杂质及滤液弃去；

(6)向CA中继续加入750μl WDB溶液，通过核酸提取仪转动增压对核酸洗涤，此步骤重复三次；

(7)向CA中加入200μl洗脱缓冲液CDB，通过核酸提取仪对核酸进行洗脱，收集洗脱液(含DNA)至1ml离心管中。

3.如权利要求1所述抗抗精神病药物个体化检测方法，其特征在于，步骤一中，所述离心吸附柱采用硅基质材料多孔亲水膜，可选择性吸附核酸。

4.如权利要求1所述抗抗精神病药物个体化检测方法，其特征在于，步骤二中，基因检测步骤包括：

(1)分离待测样本的DNA；

(2)以步骤(1)获取的DNA为模板，在dNTP、反应缓冲液、DNA切割剂存在的情况下，在寡核苷酸分子的引导下进行单链化衍生。所述寡核苷酸分子分为第一引导序列和第二引导序列，同时加入两条序列各异的测序探针，分别被定义为第一测序探针和第二测序探针，在所述两条探针的5’端分别被标记了彼此不同的荧光分子，在其3’端分别被标记了淬灭基团；

(3)对步骤(2)的单链化衍生产物分别与第一测序探针和第二测序探针的杂交结果进行判读；

(4)采用微量荧光检测仪判读荧光强度，采用配套软件分析结果。

5.如权利要求1所述抗抗精神病药物个体化检测方法，其特征在于，步骤四中，高效液相色谱法测定药物谷浓度步骤包括：

(1)色谱条件选择：色谱柱Waters C18(5μm，4.6×250mm)；流动相：甲醇-水(55∶45)；流速：1.0mL/min；柱温：35℃；检测波长：235nm；进样量：20μL；

(2)制备对照品储备液，分别精密移取各药物对照品储备液适量，用甲醇稀释成为标准系列溶液；

(3)样品处理方法：取200μL血清样品，加入600μL甲醇，涡旋混匀，15000rpm离心5min。取上清液20μL进样；

(4)专属性试验：取空白血清处理后分析，考察内源性物质干扰；

(5)线性关系考察：取系列混合标准血清溶液各200μL，进行样本处理，以对照品峰面积(y)对浓度(x)进行线性回归，得回归方程与线性关系；

(6)精密度与准确性：取低、中、高三个浓度质控血清，进行样本处理，取上清20μL进样分析，每个样本连续进样3次，计算相对标准差(RSD)，评估精密度；

(7)相对回收率：取低、中、高三个浓度质控血清，进行样本处理，每个浓度平行制备3份，取上清20μL直接进样分析。代入回归方程计算，以所得检测数值除以质控血清理论数值，得相对回收率。

6.如权利要求1所述抗抗精神病药物个体化检测方法，其特征在于，步骤五中，个体化给药步骤包括：根据患者基因型确定给药选择；测定药物谷浓度；判断药物谷浓度是否在安全范围；基于药物谷浓度结果调整给药剂量；多次调整使患者达到最佳剂量，进而实现个体化药物治疗。