[发明专利]乙肝肝纤维化microRNA分子标志物组合及其用途

说明书

本发明提供了一种乙肝肝纤维化microRNA分子标志物组合，其包括一种以上选自以下的microRNA核酸分子：miR‑200b、miR‑376b、miR‑655、miR‑16‑1*、miR‑130b*、miR‑361‑3p、miR‑1、miR‑493和miR‑125b‑2*。乙肝肝纤维化患者的microRNA分子标志物在血浆、血清中的含量与慢性乙型肝炎患者血浆、血清相比，含量存在显著差异，能够有效区分乙肝肝纤维化患者和慢性乙型肝炎患者。使用本发明的肝纤维化microRNA分子标志物，可用于指导乙肝肝纤维化的诊断，具有操作简单、安全无创、高灵敏性、高特异性以及易于大量筛查的特点。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体来说涉及一种乙肝肝纤维化microRNA分子标志物组合、以及该组合用于对乙肝肝纤维化患者进行诊断的应用。

背景技术

我国是乙肝大国，乙肝携带者约占总人口的7％－10％，全国约有9500万人携带乙肝病毒，其中乙肝患者大约有3000万，其中约有25％发展为慢性肝炎，进而发展为肝纤维甚至肝硬化。最后约有10％左右发展为肝细胞肝癌(HCC)。有资料显示，我国因为慢性乙型肝炎或者因乙型肝炎病感染后发生的相关疾病如肝硬化、肝癌，每年直接经济损失超过1000亿人民币，由此可见乙型肝炎病毒的感染给人民带来严重的健康危害，而且直接造成国家巨大的经济损失。

乙型肝炎病毒感染防治领域的主要问题是缺乏对患者病程发展状态的评价指标。肝纤维化患者无明显症状，血常规指标也没有明显变化。目前临床上肝纤维化并无有效诊断手段。组织病理活检是目前判断肝纤维化、肝硬化程度的“金标准”，但肝穿定位单点、取材局限，不足以反映肝脏整体状况，临床约有25％患者由于病理诊断偏差而被误诊、漏诊。FibroScan(瞬时弹性成像)是以超声检查为基础，通过测定肝脏硬度值判断肝纤维化和肝硬化分级。该检测具有方法简单、无痛、快速、患者依从性好、无需住院、重复性好、利于进行动态随访观察等优点。但在肝脏炎症活检情况、腹水、肝脏周围大血管、脂肪病变和肋间隙狭窄等因素都会限制FibroScan的应用。导致FibroScan对肝纤维化的诊断准确率较低。综上所述，目前单一技术或指标的临床应用均不能准确、及时诊断肝纤维化进展程度，使得对肝纤维化诊断仍有赖于肝穿活检病理标准，临床迫切需要一个方便、及时、无创的肝纤维化诊断指标。

近年来的研究表明，感染肝炎病毒后肝脏病变过程与microRNA密切相关。它是一种广泛存在于真核生物中的单链小分子RNA，不具有编码功能，但它能够结合于基因序列的侧翼区域抑制目标mRNA的翻译，具有高度的保守性、时序性和组织特异性。近年来的研究表明，肝炎病毒感染后肝脏病变过程与microRNA密切相关。microRNA可以通过作用于病毒本身或作用于免疫系统从而影响疾病进程，因此对肝纤维化的诊断也可有相应的作用。

因此，在临床和研究中，需要寻找可有效判断肝纤维化的microRNA分子标志物，特别是用于将肝纤维化与肝炎区别开来的microRNA分子标志物。

发明内容

本发明的一个方面提供了一种乙肝肝纤维化microRNA分子标志物组合，其包括一种以上选自以下的microRNA核酸分子：miR-200b、miR-376b、miR-655、miR-16-1*、miR-130b*、miR-361-3p、miR-1、miR-493和miR-125b-2*。各microRNA核酸分子的序列分别如下表所示。