[发明专利]一种天然提取物抑制唾液菌群产臭的验证方法

权利要求书

1.一种天然提取物抑制唾液菌群产臭的验证方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)样品的制备：以口臭患者口腔采集的唾液或导致口臭的相关菌株为原料，制成具有一定浓度的菌悬液，待用；

2)天然提取物的制备：对天然物进行提取，得天然提取物；

3)采集唾液菌群产生的气体：取步骤1)的样品9ml置于离心管中，加入步骤2)制备的天然提取物1ml，混匀，放入杜氏小管，放置于37℃恒温培养箱中培养1-7d，得测试样品；以步骤1)的样品为阳性对照，以无菌水或无菌液体培养基为阴性对照；

4)测试产生的气体中挥发性含硫化合物的含量：将步骤3)培养后的测试样品、阳性对照以及阴性对照取出，采用注射器抽取杜氏小管中所收集的气体，快速注入便携式气相色谱仪中进行分析，判断气体中挥发性含硫化合物的含量。

2.根据权利要求1所述的一种天然提取物抑制唾液菌群产臭的验证方法，其特征在于，步骤1)的菌悬液的制备具体为：

以口臭患者口腔采集的唾液为样品，将采集的唾液在0.5h内采用无菌水稀释到浓度为2×10⁶CFU/ml，备用；或者

采用厌氧液体培养基或营养肉汤培养基活化测试菌株；取新鲜培养物，用厌氧液体培养基或营养肉汤培养基制成浓度为2×10⁶CFU/ml的菌悬液。

3.根据权利要求2所述的一种天然提取物抑制唾液菌群产臭的验证方法，其特征在于，步骤1)中的相关菌株为具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌，普雷沃氏菌或克雷伯氏菌中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的一种天然提取物抑制唾液菌群产臭的验证方法，其特征在于，步骤2)具体为：

对天然物采用超声提取法进行提取，提取溶剂为80％乙醇，超声提取时间为40min。

5.根据权利要求4所述的一种天然提取物抑制唾液菌群产臭的验证方法，其特征在于，步骤2)中的天然提取物为西青果、苏木、鱼腥草、金银花、夏枯草、五倍子、牛蒡子、石榴皮、栀子、乌梅、毛冬青或甘草中的一种或多种。

6.根据权利要求1所述的一种天然提取物抑制唾液菌群产臭的验证方法，其特征在于，步骤4)中判断气体中挥发性含硫化合物含量的方法为：

阴性对照的杜氏小管中无气泡产生，则证明实验体系正常；若加入天然提取物的样品中所产生气体中挥发性含硫化合物的含量低于阳性样品，则证明该天然提取物对唾液菌群产臭具有抑制作用。

7.根据权利要求1所述的一种天然提取物抑制唾液菌群产臭的验证方法，其特征在于，步骤4)中产生的挥发性含硫化合物为H₂S、CH₃SH或(CH₃)₂S中的一种或多种。

8.一种根据权利要求1-7任一所述的天然提取物抑制唾液菌群产臭的验证方法的应用。

9.根据权利要求8所述的一种天然提取物抑制唾液菌群产臭的验证方法的应用，其特征在于，应用于实验室中筛选抑制唾液菌群产臭的天然提取物。