[发明专利]一种用于筛选抗氧化活性高的黄绿卷毛菇的DNA条形码

说明书

本发明公开了一种用于筛选抗氧化活性高的黄绿卷毛菇的DNA条形码。属于食用菌种质资源筛选技术领域。本发明与传统育种方法及其他现有DNA条形码技术相比较，具有省时、省力、省钱、准确、高效的优点，在优质黄绿卷毛菇的遗传育种上发挥积极作用，同时也为种质资源的鉴定及保护提供了一种有效方法。

技术领域

本发明涉及食用菌种质资源筛选技术领域，更具体的说是涉及一种用于筛选抗氧化活性高的黄绿卷毛菇的DNA条形码。

背景技术

黄绿卷毛菇，色泽呈金黄色，又称为黄蘑菇、金蘑菇。黄绿卷毛菇主要分布于青藏高原，主产区为西藏自治区当雄县、青海省祁连县以及四川省石渠县等，也以这三个主产区的品质最佳。黄绿卷毛菇是一种风味独特的优质食用菌，当前不能人工栽培。评价黄绿卷毛菇营养价值风味及生物学活性的主要指标包括：总可溶性蛋白、总可溶性氨基酸、总多酚、总多糖和总脂肪含量高，抗氧化活性强。按传统方法，要筛选出优质菌株十分困难，此外，由于其所分布的主产区海拔较高，样本采集也十分困难。为了实现黄绿卷毛菇的开发利用，利用DNA条形码分子鉴定技术辅助筛选优质黄绿卷毛菇菌株显得尤为重要和迫切。黄绿卷毛菇不同产地具有不同营养价值，不同风味，不同生物学活性，不同市场价格。以往对黄绿卷毛菇的选育主要利用形态学方法结合上述有益指标测定进行。

但是受到特殊的青藏高气候原环境的影响不同地区所产的黄绿卷毛菇常常出现同名异物和同物异名的现象，因此形态学鉴别法难以有效区分。更为困难的是，不能通过形态学方法来筛选出总可溶性蛋白、总可溶性氨基酸、总多酚、总多糖和总脂肪含量高，抗氧化活性强的优质菌株。DNA条形码分子鉴定技术是基于DNA条形码(基因组中保守且稳定遗传DNA序列)来进行物种和优良品质识别鉴定的分子生物学技术。它是传统育种方法的有效补充和拓展，能够在样品形态不完整或缺乏形态结构(加工制品如粉末等)时对样品进行精准和有效地鉴定。

现有的DNA条形码技术中，ITS(核糖体RNA内转录间隔区)和线粒体体中的非编码区或保守基因序列主要用于物种物鉴定；限制性片段长度多态性(restriction fragmentlength polymorphism，RFLP)操作十分繁复，结果的可靠性和可重复性较差，随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA，RAPD)易受干扰，对操作者技术水平要求较高，在辅助育种工作中难以推广；单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)对设备要求高，成本也高。

因此针对传统育种方法选育黄绿卷毛菇菌株不够准确费时费力的缺点，如何提供一种可以准确、快捷鉴别黄绿卷毛菇的所属菌株，同时实现优质品质选育的DNA条形码，具有成本低，效率高，操作简便，结果稳定可靠性重复性好的特点是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种用于筛选抗氧化活性高的黄绿卷毛菇的DNA条形码。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种筛选黄绿卷毛菇抗氧化活性指标的DNA条形码，DNA条形码的核苷酸序列包括：

如SEQ ID NO：3；

和/或SEQ ID NO：4；

和/或SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4组合；

和/或SEQ ID NO：9；

和/或SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8组合；

和/或SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：9组合；

和/或SEQ ID NO：12；

和/或SEQ ID NO：13；

和/或SEQ ID NO：14；