[发明专利]一种用于筛选抗氧化活性高的黄绿卷毛菇的DNA条形码在审
| 申请号: | 202111401645.2 | 申请日: | 2021-11-19 |
| 公开(公告)号: | CN114032326A | 公开(公告)日: | 2022-02-11 |
| 发明(设计)人: | 杨满军 | 申请(专利权)人: | 杨满军 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 孙光远 |
| 地址: | 850000 西藏自治区拉萨市城关区*** | 国省代码: | 西藏;54 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 筛选 氧化 活性 黄绿 卷毛 dna 条形码 | ||
1.一种筛选黄绿卷毛菇抗氧化活性指标的DNA条形码,其特征在于,所述DNA条形码的核苷酸序列包括:
如SEQ ID NO:3;
和/或SEQ ID NO:4;
和/或SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4组合;
和/或SEQ ID NO:9;
和/或SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8组合;
和/或SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:9组合;
和/或SEQ ID NO:12;
和/或SEQ ID NO:13;
和/或SEQ ID NO:14;
和/或SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14组合;
和/或SEQ ID NO:17;
和/或SEQ ID NO:18;
和/或SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18组合;
和/或SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20组合;
和/或SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20组合中的一种或多种。
2.一种扩增如权利要求1所述筛选黄绿卷毛菇抗氧化活性指标的DNA条形码的引物组,其特征在于,所述引物组的核苷酸序列包括:
如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2;
和/或SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6;
和/或SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11;
和/或SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16中的一组或多组。
3.根据权利要求2所述的引物组,其特征在于,所述引物组的核苷酸序列包括:如SEQID NO:1和SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11、SEQID NO:15和SEQ ID NO:16。
4.一种以抗氧化活性指标筛选黄绿卷毛菇的方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、提取待测样品基因组DNA;
S2、以S1基因组DNA为模板,选择权利要求2所述的一组或多组引物分别进行荧光PCR扩增反应,得扩增产物;
S3、S2所述扩增产物经毛细管荧光电泳检测,通过扩增产物的片段数、SSR位点数、SSR重复元件及其重复次数进行判定。
5.根据权利要求4所述的以抗氧化活性指标筛选黄绿卷毛菇的方法,其特征在于,所述步骤S3的判定标准为:
SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2引物组扩增得到含13次GAG重复元件的256bp片段和含19次GAG重复元件的274bp片段;
和/或SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6引物组扩增得到含5次CAG重复元件的257bp片段和含8次CAG重复元件的266bp片段;
和/或SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11引物组扩增得到含19次AT重复元件的254bp片段和含20次AT重复元件的256bp片段;
和/或SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16引物组扩增得到含10次GCT重复元件的282bp片段和含11次GCT重复元件的285bp片段时,判定该黄绿卷毛菇为抗氧化活性高的黄绿卷毛菇。
6.根据权利要求4所述的以抗氧化活性指标筛选黄绿卷毛菇的方法,其特征在于,步骤S2所述荧光PCR扩增反应的反应体系为:
2×Taq PCRMasterMix 5μL,基因组DNA 1μL,上游引物0.1μL,下游引物0.4μL,带荧光的M13引物0.4μL,用无菌去离子水定容至10μL。
7.根据权利要求6所述的以抗氧化活性指标筛选黄绿卷毛菇的方法,其特征在于,所述上游引物、下游引物和带荧光的M13引物浓度均为10uM。
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