[发明专利]一种用于筛选抗氧化活性高的黄绿卷毛菇的DNA条形码在审

专利信息
申请号: 202111401645.2 申请日: 2021-11-19
公开(公告)号: CN114032326A 公开(公告)日: 2022-02-11
发明(设计)人: 杨满军 申请(专利权)人: 杨满军
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11
代理公司: 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 代理人: 孙光远
地址: 850000 西藏自治区拉萨市城关区*** 国省代码: 西藏;54
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 筛选 氧化 活性 黄绿 卷毛 dna 条形码
【权利要求书】:

1.一种筛选黄绿卷毛菇抗氧化活性指标的DNA条形码,其特征在于,所述DNA条形码的核苷酸序列包括:

如SEQ ID NO:3;

和/或SEQ ID NO:4;

和/或SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4组合;

和/或SEQ ID NO:9;

和/或SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8组合;

和/或SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:9组合;

和/或SEQ ID NO:12;

和/或SEQ ID NO:13;

和/或SEQ ID NO:14;

和/或SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14组合;

和/或SEQ ID NO:17;

和/或SEQ ID NO:18;

和/或SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18组合;

和/或SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20组合;

和/或SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20组合中的一种或多种。

2.一种扩增如权利要求1所述筛选黄绿卷毛菇抗氧化活性指标的DNA条形码的引物组,其特征在于,所述引物组的核苷酸序列包括:

如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2;

和/或SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6;

和/或SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11;

和/或SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16中的一组或多组。

3.根据权利要求2所述的引物组,其特征在于,所述引物组的核苷酸序列包括:如SEQID NO:1和SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11、SEQID NO:15和SEQ ID NO:16。

4.一种以抗氧化活性指标筛选黄绿卷毛菇的方法,其特征在于,包括如下步骤:

S1、提取待测样品基因组DNA;

S2、以S1基因组DNA为模板,选择权利要求2所述的一组或多组引物分别进行荧光PCR扩增反应,得扩增产物;

S3、S2所述扩增产物经毛细管荧光电泳检测,通过扩增产物的片段数、SSR位点数、SSR重复元件及其重复次数进行判定。

5.根据权利要求4所述的以抗氧化活性指标筛选黄绿卷毛菇的方法,其特征在于,所述步骤S3的判定标准为:

SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2引物组扩增得到含13次GAG重复元件的256bp片段和含19次GAG重复元件的274bp片段;

和/或SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6引物组扩增得到含5次CAG重复元件的257bp片段和含8次CAG重复元件的266bp片段;

和/或SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11引物组扩增得到含19次AT重复元件的254bp片段和含20次AT重复元件的256bp片段;

和/或SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16引物组扩增得到含10次GCT重复元件的282bp片段和含11次GCT重复元件的285bp片段时,判定该黄绿卷毛菇为抗氧化活性高的黄绿卷毛菇。

6.根据权利要求4所述的以抗氧化活性指标筛选黄绿卷毛菇的方法,其特征在于,步骤S2所述荧光PCR扩增反应的反应体系为:

2×Taq PCRMasterMix 5μL,基因组DNA 1μL,上游引物0.1μL,下游引物0.4μL,带荧光的M13引物0.4μL,用无菌去离子水定容至10μL。

7.根据权利要求6所述的以抗氧化活性指标筛选黄绿卷毛菇的方法,其特征在于,所述上游引物、下游引物和带荧光的M13引物浓度均为10uM。

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