[发明专利]一种利用细菌产壳聚糖酶的方法在审
| 申请号： | 202111393030.X | 申请日： | 2021-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN114214301A | 公开（公告）日： | 2022-03-22 |
| 发明（设计）人： | 张硕;谷亚茹;肖刚;郝雅荞;王文斌 | 申请（专利权）人： | 上海应用技术大学;上海利康瑞生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12N1/20;C12R1/07 |
| 代理公司： | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人： | 翁若莹 |
| 地址： | 200235 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 细菌 聚糖 方法 | ||
1.一种利用细菌产壳聚糖酶的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：从保存芽孢杆菌属菌种的甘油管中取菌种于空白斜面培养基上划线培养，然后接种于种子培养基中活化培养，得到种子液；
步骤2：将种子液接入到含有酵母的发酵培养基中进行发酵培养；
步骤3：发酵培养结束后，离心收集上清液，即得壳聚糖酶粗酶液。
2.如权利要求1所述的利用细菌产壳聚糖酶的方法，其特征在于，所述步骤1中的芽孢杆菌属菌种为Bacillus licheniformis strain BCRC 11702。
3.如权利要求1所述的利用细菌产壳聚糖酶的方法，其特征在于，所述步骤1中的空白斜面培养基的配方包括：脑心浸粉30.0～40.0g/L和琼脂15.0～20.0g/L，其pH值为6～7.5；所述划线培养的条件为：温度30～40℃，时间12～24h。
4.如权利要求1所述的利用细菌产壳聚糖酶的方法，其特征在于，所述步骤1中的种子培养基的配方包括酵母提取物5.0～10.0g/L，蛋白胨10.0～20.0g/L和氯化钠5.0～10.0g/L，其pH值为5～10；所述活化培养的条件为：在15～45℃的温度条件下80～200r/min振荡培养12～24小时。
5.如权利要求1所述的利用细菌产壳聚糖酶的方法，其特征在于，所述步骤2中的发酵培养基的配方包括蛋白胨10.0～20.0g/L，酵母粉5.0～10.0g/L，磷酸氢二钾5.0～10.0g/L和无水硫酸镁1.0～2.0g/L，其pH值为5～11；所述发酵培养基在使用前于80-121℃湿热灭菌10-30min；所述种子液的接种量为2～12％的体积百分比；所述发酵培养的条件为：在25～35℃的温度条件下160～200r/min振荡培养18～42h。
6.权利要求1～5中任意一项所述的利用细菌产壳聚糖酶的方法制备所得的壳聚糖酶在酶解壳聚糖中的应用，其特征在于，所述壳聚糖酶的酶活为5-50U/mL。
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