[发明专利]一种采用可溶性的标签为载体制备司美诺肽的方法

说明书

本发明公开了一种采用可溶性的标签为载体制备司美诺肽的方法；采用可溶性的HBA标签为载体的液相肽合成法，按司美诺肽的氨基序列依次接入相应的保护氨基酸得到全保护的司美诺肽标签结合物；在连接过程中，每一步的保护氨基酸偶联及脱Fmoc保护都是在HBA标签上执行。本发明采用了可溶性的Fmoc PAL amide Tag及Fmoc‑Rink amide Tag进行司美诺肽的制备，Fmoc保护氨基酸缩合及去除Fmoc保护基团是在溶液状态中进行，所以需要的Fmoc保护氨基酸及缩合剂过量倍数较固相多肽合成(SPPS)的2.5‑4.0倍降低至1.0‑1.5倍；并且采用乙腈或甲醇析出沉淀可溶性标签类似物，其沉淀及洗涤成本较固相多肽合成使用的DMF、NMP要低很多，对环境更为友好。

技术领域

本发明涉及司美诺肽合成技术领域，具体涉及一种采用可溶性的标签(Tag)为载体制备司美诺肽(Setmelanotide)的方法。

背景技术

世界卫生组织报告显示，全球肥胖症患者自1975年以来已几乎增加了三倍。我国成人和儿童肥胖率以及因肥胖导致的经济成本上升非常显著。同时，肥胖症也增加了其它并发症的患病风险，如二型糖尿病、心血管疾病等的患病风险。

黑素皮质素(melanocortin)，也称促黑激素、促黑色素细胞激素、黑细胞促素等，是一类肽类激素，其中包含促肾上腺皮质激素(ACTH)和各类黑色素细胞刺激素(MSH)。这类激素由前脑啡黑细胞促素皮促素(POMC)在脑下垂体产生，通过结合并激活黑素皮质素受体(melanocortin receptor)(MCR)产生作用。黑素皮质素受体(melanocortin receptor)(MCR)共有5种，且均为G蛋白偶联受体：在大脑中仅表达MC3R与MC4R两种受体，二者配体为α-MSH，而刺鼠肽基因相关蛋白(Agouti-related peptide)(AgRP)是其内源性拮抗剂。

黑素皮质素系统在哺乳动物体内与瘦蛋白等竞争，共同调节了摄食活动。目前已知的释放黑素皮质素的神经仅有弓状核，位于下丘脑。弓状核其中有POMC神经细胞和AgRP神经细胞等神经元。当POMC神经释放α-MSH，食欲减退；而当AgRP神经细胞释放AgRP(Agouti-related peptide)，食欲则增强。瘦蛋白是一种负责调控饱腹感的蛋白，食欲刺激素(Ghrelin)则是一种负责刺激食欲的激素，二者共同调节了大脑内黑素皮质素系统的上游通路。这两种激素共同参与黑素皮质素在内的激素调节，而瘦蛋白-黑素皮质素之间在大脑内的平衡如果失去，则会引起早发的肥胖在内的各类新陈代谢类疾病，还将抑制免疫功能。

黑皮质素受体4(MC4R)主要在下丘脑中表达，参与控制食物摄取，能量消耗，体重维持等。实验和临床证据也表明，MC4R是肥胖症治疗的重要靶点。司美诺肽是一款寡肽类黑素皮质素-4受体(melanocortin-4 receptor，MC4R)激动剂，作用于人和大鼠黑皮质素4受体；MC4R是机体独立调节能量消耗和食欲的关键生物学通路的一部分。基因变异可能会损害MC4R通路的功能，而这可能会导致极度饥饿(食欲过盛)和早发性严重肥胖。司美诺肽作为一种靶向疗法，恢复受损MC4R通路的功能，重新建立罕见肥胖遗传性疾病患者的能量消耗和食欲控制，减少饥饿感、降低体重。

司美诺肽是内源性黑素皮质素肽α-MSH(α黑素细胞刺激素)的一种8个氨基酸环肽类似物。司美诺肽醋酸酯的化学名称为乙酰基-L-精氨酰-L-半胱氨酸-D-丙氨酰-L-组氨酸-D-苯丙氨酸基-L-精氨酰-L-色氨酰-L-半胱氨酸酰胺环(2→8)-二硫化物醋酸酯。分子式为C49H68N18O9S2(无水游离碱)，分子量为1118.5道尔顿。

司美诺肽的化学结构式为：