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[发明专利]一种Glepaglutide的制备方法-CN202310740246.1在审
发明人：赵佳;石海芳;李雪豪;罗瑞昌;纪东亮 -专利权人：杭州信海医药科技有限公司
申请日： 2023-06-21 - 公布日： 2023-09-15 - 主分类号： C07K14/605 文献下载
摘要：本发明公开了一种Glepaglutide的制备方法，涉及药物多肽制备技术领域，包括：Rink Amide Linker和固相载体偶联得到Rink Amide MBHA Resin；按照Glepaglutide的序列，脱除每个氨基酸或片段的Fmoc保护基，逐个偶联氨基酸或片段，其中His1‑Gly4采用Boc‑His(Trt)‑Gly‑Glu(OtBu)‑Gly‑OH片段得到Glepaglutide肽树脂；经裂解、纯化、冻干后得到Glepaglutide精品。该合成方法所得的粗品纯度、粗品收率和纯化收率都高于逐个偶联的所得的粗品，增加了产品的质量和纯化收率，具有广泛的实用价值和前景。
一种 glepaglutide 制备方法

[发明专利]一种采用可溶性的标签为载体制备司美诺肽的方法-CN202111388464.0在审
发明人：姬明放;张震;张艳;石海芳;何文君 -专利权人：申联生物医药（上海）股份有限公司
申请日： 2021-11-22 - 公布日： 2022-01-14 - 主分类号： C07K14/665 文献下载
摘要：本发明公开了一种采用可溶性的标签为载体制备司美诺肽的方法；采用可溶性的HBA标签为载体的液相肽合成法，按司美诺肽的氨基序列依次接入相应的保护氨基酸得到全保护的司美诺肽标签结合物；在连接过程中，每一步的保护氨基酸偶联及脱Fmoc保护都是在HBA标签上执行。本发明采用了可溶性的Fmoc PAL amide Tag及Fmoc‑Rink amide Tag进行司美诺肽的制备，Fmoc保护氨基酸缩合及去除Fmoc保护基团是在溶液状态中进行，所以需要的Fmoc保护氨基酸及缩合剂过量倍数较固相多肽合成(SPPS)的2.5‑4.0倍降低至1.0‑1.5倍；并且采用乙腈或甲醇析出沉淀可溶性标签类似物，其沉淀及洗涤成本较固相多肽合成使用的DMF、NMP要低很多，对环境更为友好。
一种采用可溶性标签载体制备司美诺肽方法

[发明专利]猪口蹄疫O型和A型二价合成肽疫苗及其制备方法与应用-CN202010652024.0在审
发明人：姬明放;张震;石海芳;杜祥月 -专利权人：申联生物医药（上海）股份有限公司
申请日： 2020-07-08 - 公布日： 2020-10-23 - 主分类号： A61K39/295 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪口蹄疫O型和A型二价合成肽疫苗及其制备方法与应用，涉及合成肽疫苗技术领域；包括T细胞辅助表位混合多肽、口蹄疫毒株主要结构蛋白VP1相关的B细胞抗原表位多肽；所述T细胞辅助表位混合多肽与B细胞抗原表位多肽相串联，所述口蹄疫毒株包括O型口蹄疫病毒和A型口蹄疫病毒；所述O型口蹄疫病毒包括OZK/93和O/MYA98/BY/2010口蹄疫病毒毒株；所述A型口蹄疫病毒包括A/GDMM/2013口蹄疫病毒毒株。试验表明该二价合成肽疫苗具有生物安全性好，易于大规模合成，可以有效预防目前国内流行的O型及A型猪口蹄疫流行毒株的感染。
口蹄疫二价合成疫苗及其制备方法应用

[发明专利]一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法-CN201611122911.7有效
发明人：马贵军;俞爱敏;石海芳;刘健 -专利权人：申联生物医药（上海）股份有限公司
申请日： 2016-12-08 - 公布日： 2020-07-10 - 主分类号： G01N33/15 文献下载
摘要：本发明提供了一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将油佐剂疫苗破乳后，所得水相抗原样品进行ZIPTIP纯化，纯化后的样品进行定性定量检测；所述破乳的方法为：将油佐剂疫苗与正丁醇混合，然后加入竞争剂，振荡混匀后，离心，即得水相抗原样品。该方法通过加入竞争剂与表面活性剂竞争抗原结合位点，从而将油佐剂疫苗中的抗原释放至水相中大大提高了水相中的抗原回收率；再将破乳后的样品采用ZIPTIP进行纯化，使样品中的杂质有效去除，大大提高了样品的纯度，由此再将样品进行定性定量分析，提高了检测结果的准确性和可靠性。
一种佐剂疫苗快速定性定量检测方法

[发明专利]一种油佐剂疫苗的破乳方法-CN201611124393.2有效
发明人： 石海芳;马贵军;俞爱敏;张新廉 -专利权人：申联生物医药（上海）股份有限公司
申请日： 2016-12-08 - 公布日： 2020-05-29 - 主分类号： G01N30/06 文献下载
摘要：本发明提供了一种油佐剂疫苗的破乳方法包括如下步骤：油佐剂疫苗与破乳剂混合，经分层后，得到水相抗原样品；所述破乳剂包括有机溶剂与酸的混合物，所述有机溶剂选自乙腈、正丁醇、苯甲醇、丁基二乙二醇、乙醇中的一种，所述酸选自盐酸、乙酸、甲酸、三氟乙酸中的一种。本发明提供的破乳方法破乳能力更强，能保证抗原主要分布于水相中，且水相与油相能完全分离，能真实反应出疫苗内有效抗原的含量及质量，抗原回收率可达90％以上。本发明的破乳方法破乳更完全，更迅速，破乳效率更高。
一种佐剂疫苗方法

[发明专利]一种口蹄疫抗原的定量方法-CN201710797692.0有效
发明人：张新廉;马贵军;张丽;俞爱敏;姬明放;石海芳;刘自立;郁莉 -专利权人：申联生物医药（上海）股份有限公司
申请日： 2017-09-06 - 公布日： 2020-02-21 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种口蹄疫抗原的定量方法，所述方法包括以下步骤：A、配置不同浓度的口蹄疫抗原标准样品，采用HPLC对标准样品进行测定，获得标准抗原浓度和抗原吸收峰面积的关联公式；B、将待测样品进行预处理，然后采用HPLC测定其抗原吸收峰面积，根据步骤A的关联公式计算待测样品的抗原浓度。本发明解决了HPLC无法在口蹄疫病毒定量中的无法广泛使用的困境，使得HPLC使用范围更加广泛和准确。且本发明采用添加杂蛋白的预处理，可大大缩短样品的处理时间，提高检测的准确性。
一种口蹄疫抗原定量方法

[发明专利]一种口蹄疫抗原的定量方法-CN201710796728.3有效
发明人：马贵军;张震;石海芳;张丽;刘自立;张新廉;姬明放;俞爱敏 -专利权人：申联生物医药(上海)股份有限公司
申请日： 2017-09-06 - 公布日： 2020-01-24 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种口蹄疫抗原的定量方法，包括以下步骤：配置不同电导、不同抗原浓度的口蹄疫抗原标准溶液样品，测定各标准溶液样品的HPLC吸收峰面积，获得口蹄疫抗原浓度与HPLC吸收峰面积及电导之间的关联公式；对待测口蹄疫抗原样品的电导进行测定和HPLC吸收峰面积进行测定；根据关联公式，通过测定的电导和HPLC吸收峰面积对口蹄疫抗原浓度进行计算，即得口蹄疫抗原浓度。本发明解决了HPLC无法在口蹄疫病毒定量中的无法广泛使用的困境，使得HPLC使用范围更加广泛和准确。
口蹄疫抗原吸收峰电导标准溶液关联公式口蹄疫病毒抗原配置

[发明专利]一种油佐剂疫苗破乳后水相的纯化方法-CN201611124382.4有效
发明人：俞爱敏;马贵军;石海芳 -专利权人：申联生物医药(上海)股份有限公司
申请日： 2016-12-08 - 公布日： 2020-01-24 - 主分类号： G01N1/34 文献下载
摘要：本发明提供了一种油佐剂疫苗破乳后水相的纯化方法，包括以下步骤：将口蹄疫疫苗破乳后的抗原样品进行凝胶电泳；切取其中一个蛋白泳道进行染色确定目标蛋白的条带位置；再切取未染色凝胶上与经染色后的目标蛋白条带位置相同的凝胶进行样品处理；经处理后的胶块进行超声萃取，所得上清液进行真空冷冻干燥或者低温冷冻离心浓缩，即可。本发明通过将破乳后的抗原采用电泳进行分离纯化，提高了抗原的纯度，使纯化后的样品检测重复性良好，提高了检测结果的准确性，且可显著降低图谱信噪比，突出目标分子。且本发明在采用凝胶电泳纯化步骤中，特定采用部分染色的方式，可简化抗原处理步骤，同时增加抗原回收率，降低仪器维护成本。
抗原染色破乳目标蛋白凝胶电泳条带位置切取真空冷冻干燥口蹄疫疫苗油佐剂疫苗电泳超声萃取蛋白泳道低温冷冻分离纯化检测结果抗原样品离心浓缩目标分子染色凝胶样品处理样品检测仪器维护上清液信噪比胶块凝胶回收率图谱

[实用新型]一种用于原油集输的加热装置-CN201822220947.X有效
发明人：姜娅红;董晓霞;石海芳;刘娜娜 -专利权人：姜娅红
申请日： 2018-12-27 - 公布日： 2019-11-05 - 主分类号： H05B3/34 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种用于原油集输的加热装置，包括第一安装板，第一安装板顶部固定安装有限位板，第一安装板上设有光伏板，光伏板一端与限位板贴合，光伏板另一端通过支架与第一安装板固定，第一安装板顶部固定有光伏发电控制器、蓄电池、逆变器，第一安装板顶部置有加热毯，加热毯上固定有加热电阻，加热电阻通过导线与逆变器相连，第一安装板底部与齿轮杆一端固定，齿轮杆另一端伸入安装架中并与万向轮固定，安装架内壁固定安装有轴承座；本实用新型所提供的技术方案能够有效克服现有技术所存在的不具有可移动功能，不具有可调节功能，不具有清洁能源发电功能的缺陷。
安装板光伏板本实用新型加热装置原油集输安装架齿轮杆加热毯逆变器光伏发电控制器蓄电池安装板固定发电功能加热电阻清洁能源可调节可移动热电阻万向轮限位板轴承座内壁伸入贴合支架

[发明专利]一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法-CN201611123588.5有效
发明人： 石海芳;马贵军;俞爱敏;刘健 -专利权人：申联生物医药（上海）股份有限公司
申请日： 2016-12-08 - 公布日： 2019-09-13 - 主分类号： G01N33/15 文献下载
摘要：本发明提供了一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法，将油佐剂疫苗破乳后，所得水相抗原样品进行ZIPTIP纯化，纯化后的样品进行定性定量检测；所述破乳方法为：将油佐剂疫苗与破乳剂混合，分层后得水相抗原样品；所述破乳剂包括有机溶剂与酸的混合物，所述有机溶剂选自乙腈、正丁醇、苯甲醇、丁基二乙二醇、乙醇中的一种，所述酸选自盐酸、乙酸、甲酸、三氟乙酸中的一种。本发明提供的破乳方法能保证抗原主要分布于水相中，能真实反应出疫苗内有效抗原的含量及质量；再将破乳后的样品采用ZIPTIP进行纯化，使样品中的杂质有效去除，大大提高了样品的纯度，由此再将样品进行定性定量分析，提高了检测结果的准确性和可靠性。
一种佐剂疫苗快速定性定量检测方法

[发明专利]一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法-CN201611123580.9有效
发明人：刘自立;马贵军;石海芳;俞爱敏;姬明放 -专利权人：申联生物医药（上海）股份有限公司
申请日： 2016-12-08 - 公布日： 2019-04-23 - 主分类号： G01N33/543 文献下载
摘要：本发明提供了一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法，包括以下步骤：将口蹄疫合成肽疫苗破乳，将破乳后的抗原样品采用竞争ELISA方法进行定性定量检测；所述破乳方法为：将口蹄疫合成疫苗与破乳剂混合，分层后得水相抗原样品；所述破乳剂包括有机溶剂与酸的混合物，所述有机溶剂选自乙腈、正丁醇、苯甲醇、丁基二乙二醇、乙醇中的一种，所述酸选自盐酸、乙酸、甲酸、三氟乙酸中的一种。本发明提供的破乳方法破乳能力更强，使样品无需进行纯化处理即可测定，缩短了检测时间；本发明采用竞争ELISA方法进行定性定量检测抗原浓度，得到的标准曲线斜率会大于常规间接竞争法，从而大大提高了检测灵敏度。
破乳定量检测定性油佐剂疫苗竞争ELISA 抗原样品有机溶剂破乳剂口蹄疫乙酸标准曲线斜率检测灵敏度纯化处理二乙二醇合成疫苗间接竞争三氟乙酸苯甲醇合成肽混合物正丁醇抗原乙醇丁基分层甲酸酸选乙腈盐酸疫苗检测

[发明专利]一种油佐剂疫苗的破乳方法-CN201611123596.X有效
发明人：马贵军;俞爱敏;石海芳;张新廉 -专利权人：申联生物医药（上海）股份有限公司
申请日： 2016-12-08 - 公布日： 2019-02-22 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本发明提供了一种油佐剂疫苗的破乳方法，包括以下步骤：将油佐剂疫苗与正丁醇混合，然后加入竞争剂，振荡混匀后，离心，即得水相抗原样品；所述竞争剂为氨基酸及其衍生物中的至少一种。该方法通过加入竞争剂与表面活性剂竞争抗原结合位点，从而将油佐剂疫苗中的抗原释放至水相中，与不加竞争剂相比，大大提高了水相中的抗原回收率，回收率达到85％以上。且本方法能对所有油佐剂疫苗进行破乳，同时在原有破乳方法基础上最大化破乳效率。
一种佐剂疫苗方法

[发明专利]一种油佐剂疫苗的精确定性定量检测方法-CN201611124386.2有效
发明人：俞爱敏;石海芳;马贵军 -专利权人：申联生物医药（上海）股份有限公司
申请日： 2016-12-08 - 公布日： 2019-01-18 - 主分类号： G01N27/447 文献下载
摘要：本发明提供了一种油佐剂疫苗的精确定性定量检测方法，包括以下步骤：将油佐剂疫苗破乳，将破乳后的抗原样品进行定量分析，同时采用凝胶电泳的手段进行纯化，然后将纯化后的抗原样品进行定性检测；所述破乳方法为：将油佐剂疫苗与破乳剂混合，分层后得水相抗原样品；所述破乳剂包括有机溶剂与酸的混合物，所述有机溶剂选自乙腈、正丁醇、苯甲醇、丁基二乙二醇、乙醇中的一种，所述酸选自盐酸、乙酸、甲酸、三氟乙酸中的一种。本发明提供的破乳方法破乳能力更强，能保证抗原主要分布于水相中，且水相与油相能完全分离，能真实反应出疫苗内有效抗原的含量及质量；通过将破乳后的抗原采用电泳进行分离纯化，提高了抗原的纯度。
一种佐剂疫苗精确定性定量检测方法

[发明专利]一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测试剂盒及其检测方法-CN201611122892.8有效
发明人：俞爱敏;石海芳;马贵军;姬明放;刘自立 -专利权人：申联生物医药（上海）股份有限公司
申请日： 2016-12-08 - 公布日： 2018-12-21 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明提供了一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测试剂盒及其检测方法，所述试剂盒包括以下组成部分：破乳剂、注射器、比色卡；所述试剂盒还包括快速检测试纸或96孔板；所述破乳剂为含0.33％体积分数盐酸的乙醇溶液、含0.05％体积分数三氟乙酸的乙腈溶液中的一种。采用本发明的试剂盒可快速定量定性检测油佐剂疫苗中的蛋白含量，该试剂盒制作简单，操作简便，无需进行繁琐的预处理，且检测结果准确，为口蹄疫疫苗行业提供了一种快速有效的检测手段。
试剂盒油佐剂疫苗定量检测试剂盒体积分数破乳剂检测定性预处理快速检测试纸口蹄疫疫苗定性检测检测结果快速定量三氟乙酸乙醇溶液乙腈溶液比色卡注射器盐酸蛋白制作

[发明专利]一种油佐剂疫苗的精确定性定量检测方法-CN201611124385.8有效
发明人：俞爱敏;马贵军;石海芳 -专利权人：申联生物医药（上海）股份有限公司
申请日： 2016-12-08 - 公布日： 2018-09-11 - 主分类号： G01N33/15 文献下载
摘要：本发明提供了一种油佐剂疫苗的精确定性定量检测方法，包括以下步骤：将油佐剂疫苗破乳，将破乳后的抗原样品进行定量分析，同时采用凝胶电泳的手段进行纯化，然后将纯化后的抗原样品进行定性检测；所述破乳方法为：将油佐剂疫苗与正丁醇混合，然后加入竞争剂混匀后，离心，取水相溶液超滤、洗滤后，进行真空冷冻干燥或浓缩，即得抗原样品。本发明通过加入竞争剂与表面活性剂竞争抗原结合位点，从而将油佐剂疫苗中的抗原释放至水相中，大大提高了水相中的抗原回收率；通过将破乳后的抗原采用电泳进行分离纯化，提高了抗原的纯度，使抗原中的表面活性剂杂质含量基本为0，从而使纯化后的样品定性检测时重复性良好，提高了检测结果的准确性。
一种佐剂疫苗精确定性定量检测方法

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