[发明专利]一种猪繁殖与呼吸综合征突变病毒及其构建方法与应用在审
| 申请号: | 202111369459.5 | 申请日: | 2021-11-15 |
| 公开(公告)号: | CN113969267A | 公开(公告)日: | 2022-01-25 |
| 发明(设计)人: | 韩军;高鹏;杨汉春;刘园园;张永宁;周磊;盖新娜;郭鑫 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
| 主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C12N15/86;C07K14/005;A61K39/12;A61P31/14 |
| 代理公司: | 北京兴智翔达知识产权代理有限公司 11768 | 代理人: | 张玉梅 |
| 地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 种猪 繁殖 呼吸 综合征 突变 病毒 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种猪繁殖与呼吸综合征突变病毒,其特征在于,所述突变病毒为在非结构蛋白nsp1β基因编码区第19位缬氨酸和20位丝氨酸均突变为甘氨酸的重组突变病毒。
2.根据权利要求1所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒,其特征在于,所述突变病毒在非结构蛋白nsp1β基因编码区第19位和第20位氨基酸位点处的核苷酸序列均为GGC。
3.根据权利要求1或2所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒,其特征在于,所述猪繁殖与呼吸综合征病毒为JXwn06毒株突变病毒,所述突变病毒记为RvJXwn-nsp1β-VS19GG。
4.一种猪繁殖与呼吸综合征病毒载体,其特征在于,所述病毒载体包含权利要求1-3任一项所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒。
5.一种权利要求1-3任一项所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)构建猪繁殖与呼吸综合征突变病毒的克隆质粒;
(2)将含有所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒的克隆质粒转染到细胞中进行病毒拯救,即得。
6.根据权利要求5所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒的构建方法,其特征在于,所述步骤(1)中,所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒的克隆质粒为包括非结构蛋白nsp1β第19位和第20位氨基酸均为丙氨酸的猪繁殖与呼吸综合征病毒序列。
7.根据权利要求5所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒的构建方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述细胞包括MARC-145、3D4/21、BHK-21、PK-15或Vero细胞中的至少一种。
8.权利要求1-3任一项所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒或其传代培养后的病毒用于制备猪繁殖与呼吸综合征疫苗的用途。
9.一种猪繁殖与呼吸综合征疫苗,其特征在于,含有权利要求1-3任一项所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒或其传代培养的病毒。
10.权利要求1-3任一项所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒用于制备增强细胞免疫疫苗的候选毒株的用途。
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