[发明专利]一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法在审

专利信息
申请号: 202111347131.3 申请日: 2021-11-15
公开(公告)号: CN114107361A 公开(公告)日: 2022-03-01
发明(设计)人: 朱也 申请(专利权)人: 南京瑞源生物技术有限公司
主分类号: C12N15/81 分类号: C12N15/81;C12N1/19;C12Q1/04
代理公司: 北京化育知识产权代理有限公司 11833 代理人: 尹均利
地址: 210000 江苏省南京市栖*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 筛选 物种 文库 酵母 菌株 基因 方法
【权利要求书】:

1.一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,其特征在于,包括以下材料:pYES2-NTB载体、酵母完全培养基与酵母缺陷型筛选培养基、贮备液、氯化钠溶液;

一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,包括以下步骤:

S100、文库构建;

S200、将空载质粒转化受体菌INVSc1;

S300、将物种文库转化受体菌INVSc1;

S400、盐浓度筛选;

S500、实验结果分析。

2.根据权利要求1所述的一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,其特征在于:所述酵母完全培养基的组成为1%Yeast extract,2%Tryptone,2%Glucose,0.02%Adenine;所述贮备液为10×TE:0.1M Tris-HCl(pH7.5),10mM EDTA,高压灭菌,10×LiAc:1M LiAc(pH7.5),高压灭菌;所述氯化钠中加入配制好SG-U固体培养基,培养基中的NaCl终浓度为0、0.5、1.0、1.3、1.5、2.0M。

3.根据权利要求1所述的一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,其特征在于:所述文库构建是根据之前已完成物种文库构建。

4.根据权利要求1所述的一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,其特征在于:所述将空载质粒转化受体菌INVSc1包括以下步骤:

S201、酵母转化;

S202、酵母转化方法;

S203、阳性克隆PCR验证。

5.根据权利要求1所述的一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,其特征在于:所述将物种文库转化受体菌INVSc1包括文库质粒转化。

6.根据权利要求1所述的一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,其特征在于:所述实验结果分析包含文库库容、文库质量检测、盐浓度筛选、测序结果BLAST、回转验证。

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