[发明专利]一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法在审
申请号: | 202111347131.3 | 申请日: | 2021-11-15 |
公开(公告)号: | CN114107361A | 公开(公告)日: | 2022-03-01 |
发明(设计)人: | 朱也 | 申请(专利权)人: | 南京瑞源生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N1/19;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京化育知识产权代理有限公司 11833 | 代理人: | 尹均利 |
地址: | 210000 江苏省南京市栖*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 筛选 物种 文库 酵母 菌株 基因 方法 | ||
1.一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,其特征在于,包括以下材料:pYES2-NTB载体、酵母完全培养基与酵母缺陷型筛选培养基、贮备液、氯化钠溶液;
一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,包括以下步骤:
S100、文库构建;
S200、将空载质粒转化受体菌INVSc1;
S300、将物种文库转化受体菌INVSc1;
S400、盐浓度筛选;
S500、实验结果分析。
2.根据权利要求1所述的一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,其特征在于:所述酵母完全培养基的组成为1%Yeast extract,2%Tryptone,2%Glucose,0.02%Adenine;所述贮备液为10×TE:0.1M Tris-HCl(pH7.5),10mM EDTA,高压灭菌,10×LiAc:1M LiAc(pH7.5),高压灭菌;所述氯化钠中加入配制好SG-U固体培养基,培养基中的NaCl终浓度为0、0.5、1.0、1.3、1.5、2.0M。
3.根据权利要求1所述的一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,其特征在于:所述文库构建是根据之前已完成物种文库构建。
4.根据权利要求1所述的一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,其特征在于:所述将空载质粒转化受体菌INVSc1包括以下步骤:
S201、酵母转化;
S202、酵母转化方法;
S203、阳性克隆PCR验证。
5.根据权利要求1所述的一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,其特征在于:所述将物种文库转化受体菌INVSc1包括文库质粒转化。
6.根据权利要求1所述的一种筛选物种文库酵母菌株耐盐基因的方法,其特征在于:所述实验结果分析包含文库库容、文库质量检测、盐浓度筛选、测序结果BLAST、回转验证。
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