[发明专利]一种检测甲胎蛋白基因和PGR13基因表达量的试剂盒及其应用

说明书

本发明提供了一种检测甲胎蛋白基因和PGR13基因表达量的试剂盒及其应用，所述试剂盒包括分别特异性扩增甲胎蛋白基因和PGR13基因的引物对。利用mRNA基因芯片对肝癌组织及癌旁组织进行分析，分析筛选结果显示在肝癌组织及癌旁组织中所述PGR13基因存在差异表达。在本发明中以甲胎蛋白基因和PGR13基因作为肝癌标志物，所述甲胎蛋白基因和PGR13基因均在肝癌组织中显著高表达，且二者呈正相关，与单独以甲胎蛋白基因作为诊断指标相比较，甲胎蛋白基因和PGR13基因联合诊断具有更高的灵敏度和特异性。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种检测甲胎蛋白基因和PGR13基因表达量的试剂盒及其应用。

背景技术

原发性肝癌是发病率和死亡率都较高恶性肿瘤之一，在原发性肝癌中，肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma，HCC)占比较高，由于缺乏有效的检测和诊断指标，多数病人在确诊时已到中晚期，错失早期治疗可能。肝癌的恶性度高，早期症状不明显，疾病发展迅速，易出现肝内转移和其他脏器多发转移，因此肝癌的早期诊断是临床诊疗的关键。

目前临床上的肝癌的筛查办法包括B超显像和肿瘤标志物甲胎蛋白(alphafetoprotein，AFP)的血清含量筛查。

专利CN101984919A公开了一种三维超声成像早期检测肝癌病变组织目标的方法，通过对扫描图象进行处理，使声象学信息能够以三维方式有效地反映出来，其图象的显示精度部分达到了低倍显微镜的效果，对诊断各期肝纤维化、慢性肝炎的炎症分期、肝硬化和肝癌的早期诊断等具有重要的应用价值。但影像学手段对早期HCC诊断的敏感性偏低，对于HCC术后复发的检出存在难度。

专利CN112098648A公开了一种检测肝癌患者血清生物标志物的方法，甲胎蛋白与多种肿瘤的发生和发展密切相关，临床上主要作为肝癌的血清标志物，用于原发性肝癌的诊断和疗效监测。因此，甲胎蛋白的高灵敏检测对于肝癌患者的早期诊断与治疗具有重要意义。所述检测肝癌患者血清生物标志物的方法，利用聚多巴胺与空心纳米金构建信号控释纳米材料，实现了对AFP简单且高效的检测。尽管其检测的灵敏度高，但是它的假阴性率高达40％，并且一些非肿瘤性疾病，如肝炎和肝硬化，其患者血液中的AFP也可能会升高。

因此，探寻新的可用于肝癌早期诊断的指标，提高诊断的准确度，将有助于肝癌的早发现和早治疗，对肝癌的治疗和诊断具有重要意义。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种检测甲胎蛋白基因和PGR13基因(G protein-coupled receptor 13，PGR13，G蛋白偶连受体13)表达量的试剂盒及其应用，所述试剂盒包括分别特异性扩增甲胎蛋白基因和PGR13基因的引物对。利用mRNA基因芯片对肝癌组织及癌旁组织进行分析，分析筛选结果表明在肝癌组织及癌旁组织中所述PGR13基因存在差异表达。在本发明中以甲胎蛋白基因和PGR13基因作为肝癌标志物，所述甲胎蛋白基因和PGR13基因均在肝癌组织中显著高表达，且二者呈正相关，与单独以甲胎蛋白基因作为诊断指标相比较，甲胎蛋白基因和PGR13基因联合诊断具有更高的灵敏度和特异性。

为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种检测甲胎蛋白基因和PGR13基因表达量的试剂盒，所述试剂盒包括分别特异性扩增甲胎蛋白基因和PGR13基因的引物对。

在本发明中通过mRNA基因芯片分析肝癌组织及癌旁组织中差异表达的基因，结果表明PGR13基因在肝癌组织中的相对表达量高于癌旁组织。

优选地，所述试剂盒中特异性扩增甲胎蛋白基因的上游引物包括SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，特异性扩增甲胎蛋白基因的下游引物包括SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。

本发明中，SEQ ID No.1：CTTTGGGCTGCTCGCTATGA；