[发明专利]一种靶向释药型复合双载药纳米粒及其制备方法和应用

说明书

本发明属于药物制剂领域，公开了一种靶向释药型复合双载药纳米粒及其制备方法和应用，选择胶束‑脂质体复合纳米粒用于同时包载抗肿瘤药物紫杉醇和抗成纤维药物槲皮素，同时对内部小粒径胶束和外层脂质体表面分别进行RGD和NGR修饰增强其主动靶向性。此外，在普通脂质制备体材料中加入MMP敏感的单硬脂酸甘油三酯(Triglycerol monostearate,TGMS)，在肿瘤MMP丰富表达的微环境中，外层脂质体破裂，释放出内部小粒径胶束和脂质体中包含的药物，这样实现时空上靶向释药，协同提高抗肿瘤效果，可为兼具肿瘤微环境响应和调控肿瘤微环境的智能释药载体研究提供思路参考和技术借鉴。

技术领域

本发明属于医药制剂技术领域，涉及一种靶向释药型复合双载药纳米粒及其制备方法和应用，具体涉及一种同时共载抗肿瘤药物和抗成纤维药物于胶束-脂质体复合纳米粒中，同时两相界面均进行功能化修饰：外层脂质体表面修饰的NGR肽可使纳米粒靶向聚集于肿瘤组织，内部小粒径胶束表面修饰RGD肽可使其精确靶向肿瘤细胞。此外，在脂质材料中加入基质金属酶敏感的三聚甘油单硬脂酸酯使复合纳米粒可以逐级释药。

背景技术

1889年英国医生Stephen Paget提出针对肿瘤转移的“种子-土壤”学说，这里“种子”指具有转移能力的肿瘤细胞，而“土壤”是指为肿瘤生长提供合适微环境的器官或组织，只有在适宜的“土壤”中，“种子”才能被定植，增殖和转移。因此，“土壤”在肿瘤的发生发展中都起着至关重要的作用。具体而言，“土壤”即“肿瘤微环境”(Tumor microenvironment,TME)由一系列基质(extracellular matrix，ECM)、内皮细胞、周细胞、成纤维细胞(Cancer-associated fibroblasts，CAFs)、平滑肌细胞和免疫细胞组成，同时具有缺氧，弱酸性和组织液压力较高等特征。其中，作为ECM和旁分泌信号的主要产生者，CAFs是这些事件中的中心细胞类型。这些CAFs在肿瘤外部形成一道抑制性屏障，从而导致药物或纳米粒较差的肿瘤组织分布性和渗透性，进而不能达到有效剂量。因此，有效调节CAFs以便破坏肿瘤组织抑制性屏障，同时结合抗肿瘤药物治疗能够达到更为理想的抗肿瘤效果。紫杉醇(PTX)常被用作乳腺癌的一线治疗药物，而研究表明槲皮素(Que)可有效下调CAFs中Wnt16表达，进而重塑肿瘤微环境并增加纳米粒子对肿瘤部位的渗透，因此，Que和PTX组合用于协同抗肿瘤和抗纤维化治疗。

然而，PTX和Que都是难溶性药物，不能直接用于注射给药。不过近些年来蓬勃发展的纳米递送系统为解决以上问题提供了方向。我们团队在之前的工作中发现聚乳酸-聚乙二醇共聚物(PLA₁₃₀₀-PEG₂₀₀₀)可以很好的包载紫杉烷类药物，同时所形成的胶束具有20nm左右的粒径。此外，一系列研究表明脂质体也是一种良好的载体材料，可以同时包载水溶性药物和脂溶性药物。因此，我们考虑将抗肿瘤药紫杉醇包载于PLA₁₃₀₀-PEG₂₀₀₀聚合物胶束中，再将槲皮素和这个制备的小粒径的胶束共同包载于脂质体中。其中，小粒径胶束包在内水相中，而槲皮素包载在脂质双分子层中。

以上所提出的胶束-脂质体复合纳米粒实现了抗肿瘤药物和抗纤维化药物的共载，但是对胶束或/和脂质体表面进行功能化修饰从而增强其主动靶向作用仍然值得探索。氨肽酶N(APN/CD13)在包括乳腺癌在内的许多实体瘤的新生血管内皮细胞表面高度表达。NGR肽是一种含有Asn-Gly-Arg(NGR)基序的肽，其与CD13有高亲和力和特异性，已被鉴定为靶向肿瘤血管系统的有效靶向配体。因此，我们考虑将NGR肽用于修饰脂质体的表面，以进一步提高胶束-脂质体复合纳米粒靶向肿瘤部位的能力。此外，据报道整合素受体在大多数类型的肿瘤细胞中高度表达，而Arg-Gly-Asp(RGD)被广泛用作可以与整联蛋白受体结合的特异性配体。因此，我们选择将RGD修饰在胶束表面作为第二级选择性靶头，从而提高可以与乳腺癌细胞结合能力并被其摄取进入细胞。