[发明专利]蚕豆抗盐基因F-box及其应用有效
| 申请号： | 202111273343.1 | 申请日： | 2021-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN113832164B | 公开（公告）日： | 2023-03-24 |
| 发明（设计）人： | 沙爱华;陈银华;郝树琳;黄林涛;蒋浩中;王燕娟 | 申请（专利权）人： | 海南大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/10;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/20;A01H6/82 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 侯华民 |
| 地址： | 570100 海*** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 蚕豆 基因 box 及其 应用 | ||
1.蚕豆抗盐基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.蚕豆抗盐蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.权利要求1所述蚕豆抗盐基因的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
以经过质量浓度0.8％氯化钠浸泡24h后的蚕豆种子为材料，提取总RNA，反转录合成cDNA第一链，PCR扩增该基因片段，回收PCR产物。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，PCR扩增所使用的引物为：
上游引物：5’-
下游引物：5’-
5.权利要求1所述蚕豆抗盐基因的拟南芥过表达载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取蚕豆抗盐基因PCR产物，加入buffer、DTT、dATP和T4 DNA聚合酶I，在PCR仪上22℃处理30min，75℃处理20min；
(2)取载体，加入ApaI内切酶、buffer、ddH2O，37℃水浴锅中酶切5h；
(3)取酶切产物加入至步骤(1)的产物中，混合均匀后22℃处理10min，65℃处理5min，得混合物；
(4)取混合物转化大肠杆菌感受态细胞，筛选重组转化子。
6.权利要求1所述蚕豆抗盐基因或权利要求2所述蚕豆抗盐蛋白在提高植物抗盐性方面的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述植物为烟草或拟南芥。
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