[发明专利]向导RNA作用靶点的筛选方法、计算机存储介质及电子设备有效
申请号: | 202111257801.2 | 申请日: | 2021-10-27 |
公开(公告)号: | CN113990394B | 公开(公告)日: | 2023-01-24 |
发明(设计)人: | 胡杨俊;韩永红;许晓静 | 申请(专利权)人: | 云舟生物科技(广州)股份有限公司 |
主分类号: | G16B30/10 | 分类号: | G16B30/10;G16B20/30 |
代理公司: | 广州国鹏知识产权代理事务所(普通合伙) 44511 | 代理人: | 葛红 |
地址: | 510663 广东省广州市科学城掬泉*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 向导 rna 作用 筛选 方法 计算机 存储 介质 电子设备 | ||
1.一种向导RNA作用靶点的筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、从基因序列库中获取PAM序列;
S2、将所述PAM序列的NGG以及所述PAM序列的前n个碱基取出,生成向导RNA,其中n为自然数;
S3、将所述向导RNA与所述基因序列库比对,判断所述向导RNA的基因在所述基因序列库中的位置;
S4、获取所述向导RNA中每个基因上游的m个碱基,以及对应基因的碱基区域的所述向导RNA,在含有基因的所述向导RNA进行打靶,剔除没有基因的所述向导RNA,其中m为自然数;
S5、剔除含有连续a个T的所述向导RNA,其中a为自然数;
S6、剔除没有在转录本外显子上的所述向导RNA;
S7、获取未被剔除的所述向导RNA,筛选含有设定前缀的转录本的所述向导RNA,筛选含NM和NR前缀的转录本的gRNA序列,前缀包括NCBI库的转录本公开的前缀标识NM、XM、NR、XR;
S8、获取步骤S7得到的所述向导RNA的基因,并将外显子组合,形成具有所述设定前缀的转录本序列;
S9、截取所述转录本序列中预定长度的序列,
其中,步骤S7包括:给每个所述向导RNA赋值,同时增加靶转录本SNP标识,生成数据库,给每个所述向导RNA赋值的方法为:
所述向导RNA的序列中GC含量与分值成反比;
所述向导RNA的序列中连续碱基数量与分值成反比;
所述向导RNA的脱靶率与分值成反比。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述基因序列库为NCBI,所述PAM序列为所述基因库序列中的序列正链和序列负链。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,n=20,m=20。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S4包括:将有打靶的位置按照顺序生成唯一的ID号,最终生成没有筛选的向导RNA背景库。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,a≥4。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S9中,截取所述转录本序列中10%-65%之间的序列长度。
7.一种计算机存储介质,其特征在于,包括一条或多条计算机指令,所述一条或多条计算机指令在执行时实现如权利要求1-6中任一项所述的方法。
8.一种电子设备,包括存储器和处理器,其特征在于,
所述存储器用于存储一条或多条计算机指令;
所述处理器用于调用并执行所述一条或多条计算机指令,从而实现如权利要求1-6中任一项所述的方法。
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