[发明专利]用于检测CLDN18.2 RNA的单链DNA探针及检测方法在审
申请号: | 202111197496.2 | 申请日: | 2021-10-14 |
公开(公告)号: | CN115896279A | 公开(公告)日: | 2023-04-04 |
发明(设计)人: | 范林洋 | 申请(专利权)人: | 桐庐纳泰医学检验实验室有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6818;C12N15/11 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人: | 郑万芳 |
地址: | 311500 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 cldn18 rna dna 探针 方法 | ||
1.一种用于检测CLDN18.2 RNA的单链DNA探针及检测方法,其特征在于:其是具有茎环状结构的寡聚单链脱氧核糖核苷酸分子,5’末端和3’末端各有3-6个核苷酸相互匹配从而以氢键相互吸引,形成“茎环”结构。
2.一种如权利要求1所述的用于检测CLDN18.2 RNA的单链DNA探针及检测方法,其特征在于:在5’末端和3’末端分别有一个荧光发射基团和与之对应的荧光淬灭基团。
3.一种如权利要求2所述的用于检测CLDN18.2 RNA的单链DNA探针及检测方法,其特征在于:所述分子探针为DNA探针,所述分子探针含有可与CLDN18.2基因编码的RNA第96-111碱基杂交的核酸序列,且所述分子探针不与双链DNA结合。
4.一种如权利要求3所述的用于检测CLDN18.2 RNA的单链DNA探针及检测方法,其特征在于:所述分子探针含有如下核酸序列:5′-CCGCAATCCCAATCAG-3′,分子探针的5′和3′端分别含有3-6个可互补配对的碱基,形成茎环结构中的“颈部”。
5.一种如权利要求4所述的用于检测CLDN18.2 RNA的单链DNA探针及检测方法,其特征在于:所述分子探针为RNA探针,序列如下:5′-CGTATGCCCGCAATCCCAATCAGTTACG--3′。
6.一种如权利要求5所述的用于检测CLDN18.2 RNA的单链DNA探针及检测方法,其特征在于:所述分子探针的一端带有荧光基团,另一端带有淬灭基团,且所述荧光基团和淬灭基团相互匹配。
7.一种如权利要求6所述的用于检测CLDN18.2 RNA的单链DNA探针及检测方法,其特征在于:所述荧光基团选自FAM、HEX、TET、VIC、ROX、CY5、CY3、JOE、ALEX和CAL中的任意一种,所述淬灭基团选自DABYSL、BHQ、ECLIPSE和TAMRA中的任意一种。
8.一种如权利要求7所述的用于检测CLDN18.2 RNA的单链DNA探针及检测方法,其特征在于:所属检测方法可以在常规96孔板中进行,检测试剂与待测样品结合后读取荧光值即可。
9.一种如权利要求8所述的用于检测CLDN18.2 RNA的单链DNA探针及检测方法,其特征在于:所述分子探针在活细胞水平检测时需要通过转染试剂介导,转染试剂选择链霉素O(SLO)。
10.一种如权利要求9所述的用于检测CLDN18.2 RNA的单链DNA探针及检测方法,其特征在于:所述分子探针可以与具有光学,磁学性质的金纳米颗粒和氧化铁等纳米材料组合实现更灵敏的检测。
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