[发明专利]鸡肠源益生乳酸菌制剂的真空冷冻干燥工艺

权利要求书

1.鸡肠源益生乳酸菌制剂的真空冷冻干燥工艺，其特征在于，包括以下步骤：

步骤S1:将筛选出的戊糖片球菌菌株从-80℃冰箱中取出，用接种环将该菌株接种至MRS固体培养基上，于静置培养箱中培养，温度为16℃-42℃，过夜培养；用接种环从培养后的MRS固体培养基上挑取复苏的单菌落，接种至一支含有30mLMRS液体培养基的试管中，于振荡培养箱中培养，温度为16℃-42℃，转速160-200rpm，过夜培养，用于制备菌悬液；

步骤S2:将发酵液转至灭过菌的50mL离心管中，放入离心机中进行离心，倒去上清并对菌体进行称重，得到乳酸菌的菌泥，备用；将离心后制备的乳酸菌的菌泥，进行一系列梯度稀释，即10⁶-10⁸倍稀释，用枪吸取200μL涂布至MRS固体培养基上，16℃-42℃过夜培养，测定其冻干前的活菌数；

步骤S3:选用脱脂奶粉、海藻糖和低聚果糖作为原料配制保护剂，以重量百分比计，保护剂中各组分的配比为脱脂奶粉6-18％，海藻糖6-18％，低聚果糖1-9％，余量为蒸馏水，配好后灭菌，备用；

步骤S4：将步骤S2得到的菌泥和步骤S3得到的保护剂按重量比1:4-9进行配比，将二者通过混匀设备进行充分混匀，分装至冻干瓶中；

步骤S5:将制备好的菌泥与保护剂的混合液放至4℃冰箱中进行预冻1-3h，再放入-20℃冰箱中进行预冻2-24h，将预冻的样品放至真空冷冻干燥机中进行冻干，冻干时间为14-24h，压力为200pa以下，温度为-50℃～-60℃，冻干之后取出放至4℃冰箱中进行保藏。

2.根据权利要求1所述的鸡肠源益生乳酸菌制剂的真空冷冻干燥工艺，其特征在于，所述步骤S3中，保护剂的配比为脱脂奶粉18％，海藻糖12％，低聚果糖5％，余量为蒸馏水。

3.根据权利要求1所述的鸡肠源益生乳酸菌制剂的真空冷冻干燥工艺，其特征在于，所述步骤S4中，将步骤S2得到的菌泥和步骤S3得到的保护剂按重量比1:6进行配比。

4.根据权利要求1所述的鸡肠源益生乳酸菌制剂的真空冷冻干燥工艺，其特征在于，所述步骤S2中，选用固定角转头离心机，且离心机的工作条件为5000-8000rpm、5-20min。

5.根据权利要求1所述的鸡肠源益生乳酸菌制剂的真空冷冻干燥工艺，其特征在于，所述步骤S4中，混匀设备包括混匀平台(1)、防尘箱(2)、观察箱门(3)、主备电源(4)、混料组件(5)、储放箱(6)和物料盒(7)，所述混匀平台(1)的顶部端面一侧固定安装有防尘箱(2)，所述防尘箱(2)的顶部端面中央固定安装有主备电源(4)，所述防尘箱(2)的内侧设置有混料组件(5)，所述防尘箱(2)的端面一侧通过合页固定安装有观察箱门(3)，所述混匀平台(1)的顶部端面另一侧固定安装有储放箱(6)，且储放箱(6)的顶部端面固定安装有物料盒(7)。

6.根据权利要求5所述的鸡肠源益生乳酸菌制剂的真空冷冻干燥工艺，其特征在于，所述混料组件(5)包括安装基座(51)、电动导轨(52)、限位开关(53)、导轨滑块(54)、连接支架(55)、紧固架(56)、防护罐(57)、混料筒(58)和安装罐盖(59)，两个所述安装基座(51)分别固定安装在混匀平台(1)的顶部端面位于防尘箱(2)内部两侧，所述安装基座(51)的顶部端面中央固定安装有电动导轨(52)，且电动导轨(52)的顶部端头与防尘箱(2)的顶部内壁贴合连接，所述电动导轨(52)的顶部和底部均固定安装有限位开关(53)，两个所述电动导轨(52)的外壁一侧均安装有导轨滑块(54)，且两个导轨滑块(54)之间安装有连接支架(55)，所述连接支架(55)的端面一侧固定安装有紧固架(56)，且紧固架(56)的顶部和底部均与导轨滑块(54)固定连接，所述连接支架(55)的端面中央固定安装有防护罐(57)，且防护罐(57)的内部插接安装有混料筒(58)，所述防护罐(57)的顶部端面螺接安装有安装罐盖(59)，所述安装罐盖(59)的端面中央固定安装有密封垫板，且密封垫板的内侧与混料筒(58)的顶部端面贴合连接。