[发明专利]一种可注射聚氨酯-小肠黏膜下层细胞微载体及其制备方法和用途

说明书

本发明提供了一种可注射聚氨酯‑小肠黏膜下层细胞微载体及其制备方法和用途，属于生物医用材料领域。所述可注射聚氨酯‑小肠黏膜下层细胞微载体是表面分布SIS粉末的聚氨酯微球。本发明采用特定粒径范围的SIS粉末制备得到聚氨酯‑小肠黏膜下层微球，该微球具有良好的生物相容性，可以实现细胞在其表面早期粘附，并对细胞增殖有良好的促进作用，可作为微载体使用，提高细胞产率。同时，该微球具有良好的可注射性能，体内填充效果良好，可用于体内填充修复，便捷、安全，具有较好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物医用材料领域，具体涉及一种可注射聚氨酯-小肠黏膜下层细胞微载体及其制备方法和用途。

背景技术

现今，载体表面大规模培养细胞成为其在再生修复中的重要应用领域。微载体培养细胞有其独特的优势：它们具有大的表面积/体积比率，实现了一个可放大的均一培养系统，使细胞能在少量材料表面实现粘附及大规模扩增；扩增后的细胞容易聚合在微载体表面形成复合体，促进细胞间的相互作用；分泌的胞外基质也支持胞内活动，此两种作用都能够促进细胞的增殖。

细胞在微载体表面扩增后，可同生物相容性良好的载体材料一同作为复合材料植入损伤组织，避免单纯注射细胞带来的细胞大量死亡及分散的现象，同时，细胞-载体复合物对患处进行损伤修复，又提高了修复效果；此外，可注射的微载体能够减少创伤及感染风险。

目前，已经有聚氨酯作为细胞微载体，提高了细胞的扩增能力。然而，动态培养环境中，微载体对细胞的早期粘附特性是影响细胞后续铺展及增殖的关键，PU为生物惰性材料，缺乏生物活性成分，有必要对其进行生物化改性。迄今为止，大量研究将生物活性多肽、细胞因子等细胞外基质成分用于PU的生物化改性，以提高材料的生物相容性及生物活性，增大其适用范围。

SIS是一种天然的细胞外基质生物材料。SIS主要由I型胶原构成，还含有一定量的生物活性成分及因子，如FN、LN等多糖蛋白以及VEGF、TGF-β1、FGF，EGF等因子。SIS对于调节细胞的粘附、迁移、增殖和分化具有重要作用，同时可以诱导血管出芽和新生，促进组织的修复再生。而在临床研究中，SIS已经被食品药品监督管理局批准用于瘘(直肠瘘，尿道瘘、阴道瘘)、疝(腹股沟疝、腹疝)以及硬脑膜等的修复重建。SIS在组织工程研究中常被制成膜片参与再生修复。因此，利用SIS对PU微载体进行改性制备PU-SIS微载体有望提高微载体生物活性及细胞粘附性。

但是，研究发现SIS很难在PU微载体上良好附着，从而会影响细胞生长。寻找到合适方法，使SIS在PU微载体上良好附着，制备一种适于细胞生长的PU-SIS微载体具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种可注射聚氨酯-小肠黏膜下层细胞微载体及其制备方法和用途。

本发明提供了一种可注射聚氨酯-小肠黏膜下层细胞微载体，它是表面分布SIS粉末的聚氨酯微球。

进一步地，所述SIS粉末的粒径r为63μm≤r≤106μm。

进一步地，所述可注射聚氨酯-小肠黏膜下层细胞微载体的粒径为106～270μm。

进一步地，前述的可注射聚氨酯-小肠黏膜下层细胞微载体是按照如下方法制备而成：

(1)将两种低聚物二元醇预混后与异氰酸酯发生预聚反应，再加入扩链剂进行扩链反应，得聚氨酯预聚物；

(2)将中和剂溶于溶剂中，并加入SIS粉末，搅拌均匀，配制成乳化液；

(3)将步骤(1)制备的聚氨酯预聚物滴加到步骤(2)配制的乳化液中，反应得聚氨酯-小肠黏膜下层颗粒；

(4)将聚氨酯-小肠黏膜下层颗粒纯化、过筛，即得聚氨酯-小肠黏膜下层细胞微载体。

进一步地，