[发明专利]一种交联人源白蛋白真皮填充剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种交联人源白蛋白真皮填充剂及其制备方法，将白蛋白溶解于生理盐水中，冷藏，加入化学交联剂，低温搅拌均匀，冷藏，水浴加热开始交联反应，制得交联白蛋白凝胶；向交联白蛋白凝胶中加入30倍体积生理盐水，分5次加入，每次浸泡1小时，倒去生理盐水，得到纯化的交联白蛋白凝胶；将交联白蛋白凝胶使用筛分法制粒；将制粒后的交联白蛋白凝胶颗粒分散于生理盐水中，制得交联白蛋白悬浊液，填充至预灌装注射器，湿热灭菌，制得白蛋白真皮填充剂。白蛋白经过交联反应得到的交联白蛋白具有物理填充功能，且具有良好的生物相容性，可以作为医学美容中真皮填充剂。

技术领域

本发明属于医学美容技术领域，具体涉及一种交联人源白蛋白真皮填充剂及其制备方法。

背景技术

白蛋白是人体血液中存在的蛋白，由肝实质细胞合成，在血浆中的半衰期为15-19天，是血浆中含量最多的蛋白质，占血浆总蛋白的40％-60％。成熟白蛋白由585个氨基酸残基组成，是一条单肽链，折叠成为近似球形。

白蛋白主要功能是维持血液渗透压，并作为血液中的运输蛋白，可以与多种药物和内源性物质结合。提纯的白蛋白是一种重要的药物。获取白蛋白的传统方法是提取人血液。由于人血浆来源有限，并可能带有艾滋病毒、乙肝病毒等病毒污染，从人血中提取白蛋白成本高且有安全隐患。随着生物工程技术的进展，采用生物工程菌株发酵能够获取白蛋白。具体方法为，克隆人体白蛋白基因，将该基因植入哺乳动物细胞中，通过细胞培养，表达人白蛋白，提取纯化得到人白蛋白。目前，采用基因工程方法制取白蛋白是一项成熟的公开的技术。

发酵得到的白蛋白与提取自人血液的白蛋白具有相同的结构，没有免疫原性。

随着白蛋白产业化发酵生产方式的成功实现，白蛋白除了作为高纯度药物应用于临床之外，作为一种人源蛋白，其他潜在用途的实现也成为可能。

发明人在实际使用过程中发现，这些现有技术至少存在以下技术问题：

在医美行业，人类一直在寻找具有良好生物相容性和抗酶解性能的生物材料，作为真皮填充剂，达到消除或减轻面部皱纹的作用。真正意义上的具有良好生物相容性的第一个真皮填充剂，是提取自动物组织(牛皮或猪皮)的胶原经过交联制成的交联胶原。其本质是通过化学反应将胶原交联，形成具有抗酶解性能的具有三维结构的凝胶，这种凝胶注射到真皮后，能够起到物理支撑作用，达到消除或减轻面部皱纹的效果。但是，由动物组织(牛皮或猪皮)提取得到的胶原，对于人体来说，是一种外来蛋白，被免疫系统识别为异物，会相应的启动免疫反应，表现为过敏，严重的会危及生命。所以，采用人体本身具有的蛋白作为原料，替代动物组织(牛皮或猪皮)提取得到的胶原，可避免免疫原性，得到安全的真皮填充剂产品。

事实上，任何一种对人类没有免疫原性的蛋白质，都可以通过交联方法，生成具有三维立体结构的凝胶，作为人体真皮填充剂使用。

人源白蛋白发酵方法生产已经成功产业化，为采用交联方法制取真皮填充剂提供了基础。

采用人源白蛋白，开发合适的交联方法，制备真皮填充剂，需要创造性的解决工艺问题。

发明内容

针对现有技术中存在的提取自动物组织(牛皮或猪皮)的胶原含有人体不具有的蛋白质，作为真皮填充剂植入人体时，由于具有免疫原性，能够引起过敏反应，安全性较低问题，本发明提出了一种交联人源白蛋白真皮填充剂及其制备方法，其目的为：采用人源白蛋白作为人体真皮填充剂，克服了免疫原性问题，同时，为了使得人源白蛋白具有较好的支撑能力，发明了化学交联技术，将人源白蛋白用化学共价键连接起来，形成一个巨型分子，呈现为三维网状结构，具有较好的支撑能力，作为真皮填充剂，可有效去除面部皱纹。

为实现上述目的本发明所采用的技术方案是：提供一种交联人源白蛋白真皮填充剂及其制备方法，包括如下步骤：