[发明专利]一种眼用纳米胶束及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种眼用纳米胶束及其制备方法和应用，眼用纳米胶束的制备方法，包括：两亲性聚肽的合成：以mPEG‑NH₂作为引发剂，对Lys(Cbz)‑NCA和Phe‑NCA单体进行NCA开环聚合，合成Cbz基团保护的聚肽前体；利用TFA和氢溴酸脱去聚肽前体的CBz基团，得到两亲性聚肽；两亲性抗氧化聚肽的合成：利用两亲性聚肽的氨基与超氧化物歧化酶模拟化合物TEMPO的羧基进行酰胺反应，得到两亲性抗氧化聚肽；眼用纳米胶束的制备：利用两亲性抗氧化聚肽与p38MAPK抑制剂的自组装获得眼用纳米胶束。本发明的眼用纳米胶束具有很好的干眼治疗效果。

技术领域

本发明属于眼用药物制剂技术领域，具体涉及一种眼用纳米胶束及其制备方法和应用。

背景技术

干眼症是一种发生于眼表的多因素疾病，以泪膜高渗、炎症为特点，可导致眼部不适，甚至视力障碍，严重影响患者的生活质量。目前，干眼症影响了世界上约30％的人口，已成为全球最常见的眼表疾病，给全社会带来了巨大的经济负担。炎症是干眼的一个关键因素。皮质类固醇是最常用的治疗手段，但存在着如青光眼和白内障等严重的并发症，其长期应用受到很大限制。包括环孢素-A滴眼液在内的多种免疫调节剂已被批准用于干眼症治疗；然而，这些免疫调节剂起效慢(一般需要数月)，并伴随着先天性炎症介质抑制的缺陷。此外，由于药物在眼表被迅速消除，需要频繁给药，这会导致患者依从性差，用药效果降低。因此，迫切需要开发安全且高效的干眼症疗法。

有丝分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)和核因子κB(NF-κB)在眼表上皮细胞中可被高渗环境直接激活，是先天免疫系统的核心组成部分，也是干眼症发生过程中的重要阶段。MAPK是哺乳动物中最重要的保守蛋白激酶家族之一，它将细胞外信号与细胞内机制联系起来，调节大量如炎症和凋亡等细胞过程。NF-κB可以被上游的MAPK调控，从而指导许多基因的表达，包括导致角膜屏障功能障碍的基质金属蛋白酶(MMPs)，如MMP-9和促炎症细胞因子，如IL-1β。这些酶和细胞因子的过度释放放大了炎症级联反应，并活化抗原呈递细胞(APC)(例如巨噬细胞)。因此，被激活的APC带来了具有长期维持性的适应性免疫反应，使干眼症的炎症更容易发作。尽管APC的主要作用是递呈抗原，但其同时也作为关键的免疫细胞发挥了重要作用，一旦APC被激活，其过度产生的促炎因子等可能加剧上皮细胞损伤。以上所述反应都会促进细胞凋亡，凋亡是干眼症中一个重要的病理特点。总之，通过抑制上皮细胞和常驻免疫细胞的MAPK信号通路来缓解炎症，是一个潜在的在早期阶段打破干眼症恶性循环的手段。

p38 MAPK是MAPK家族中的一类，是抗炎治疗的重要靶点。因此，抑制p38 MAPK能够抑制相关炎症细胞因子的表达并清除凋亡细胞。然而，仅仅使用p38 MAPK的小分子抑制剂来治疗相对疾病的尝试，其疗效普遍有限。这是因为，在恶性循环之外，还有一个上游媒介，即以氧化应激为特征的活性氧(ROS)的过量产生，在干眼症发展中起着核心作用。ROS的过度产生可能是由于长期暴露于大气中的氧气，由于泪膜的不稳定而导致抗氧化剂支持不足，以及使用含有防腐剂的眼药水而诱发的。而且，过量的ROS不仅作为上游激活剂调节p38MAPK和下游细胞因子的转录，而且在炎症期间直接导致DNA、蛋白质、脂质和附属组织的损伤。通过抗氧化剂清除过度产生的ROS，以缓解氧化应激驱动的干眼症。超氧化物歧化酶模拟化合物Tempo是一种廉价且稳定的硝基自由基，具有很强的抗氧化活性，其衍生物、纳米药物和凝胶已被利用于各种，如头部创伤、高血压、动脉硬化、炎症性肠病、心肌梗塞等氧化应激损伤的治疗。然而，由于亲水的Tempo在眼局部给药后被迅速被清除(应用后15-30秒)，其眼部应用受到严重限制。此外，将亲水的Tempo负载到疏水性的胶束纳米颗粒或聚合物微颗粒中也充满挑战。

发明内容

基于现有技术中存在的上述缺点和不足，本发明的目的是提供一种眼用纳米胶束及其制备方法和应用。

为了达到上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

一种眼用纳米胶束的制备方法，包括以下步骤：

(1)两亲性聚肽的合成