[发明专利]一种两步酶法制备(R)-N-(2,6-二甲基苯基)氨基丙酸甲酯的方法

说明书

本发明公开了一种两步酶法制备(R)‑N‑(2,6‑二甲基苯基)氨基丙酸甲酯的方法，所述方法以固定化酯酶PAE为催化剂，以(R,S)‑N‑(2,6‑二甲基苯基)氨基丙酸甲酯为底物，以水为溶剂，在30‑40℃反应制备(R)‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸；将(R)‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸与脂肪酶、无水甲醇、水和正己烷混合，在30‑60℃反应制备(R)‑N‑(2,6‑二甲基苯基)氨基丙酸甲酯。本发明固定化酯酶PAE稳定性好，可重复利用。本发明制备的(R)‑DMPM的酯化率和e.e._p分别为96.23％和99.12％。

(一)技术领域

本发明涉及一种两步酶法催化制备高光学纯(R)-N-(2,6-二甲基苯基)氨基丙酸甲酯的方法。

(二)背景技术

由于对减少环境污染的重视和对绿色化学合成工艺的倡导，具有特异性药效以及环境保护性的手性农药的开发成为了农药制备的研究热点。精甲霜灵是一种由Ciba-Geigy公司首先开发的酰胺类的杀菌剂，对疫霉病菌、霜酶病菌、腐酶病菌侵染所致的植物病害有特异高效的防治效果。

(R,S)-N-(2,6-二甲基苯基)氨基丙酸甲酯((R)-DMPM)是制备精甲霜灵的关键手性中间体。已经有研究表明，R型的甲霜灵的活性比S型的甲霜灵要高20-30倍，有些方面甚至是100倍。因此，制备高纯度的(R)-DMPM成为了农药行业生产高纯度精甲霜灵的关键。

目前，制备(R)-DMPM有两种方法：一种是化学法，以L-乳酸和2-6-二甲基苯胺为原料进行有机合成，这种化学合成方法是目前工业上主要制备(R)-DMPM的方法。工艺十分成熟且可以快速有效的生产，但是反应过程复杂且在合成过程中需要加入有机溶剂、硫酸等有毒有害物质，会对环境产生污染。所制备的(R)-DMPM的光学纯度只有92％左右，需要进行二次提纯。还有一种方法为酶法拆分然后化学甲酯化，通过生物酶将外消旋的甲霜灵进行拆分制备高纯度的(R)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸((R)-MAP-acid)，在酸性条件下再将(R)-MAP-acid和无水甲醇进行甲酯化制备(R)-DMPM。这种制备方法相较第一种减少了有害物质的排放，减少了能耗，但是在化学甲酯化的过程中会发生外消旋，大大降低精甲霜灵的纯度，有时候化学甲酯化制备得到的(R)-DMPM光学纯度会下降到95％以下。

(三)发明内容

本发明目的是提供一种两步酶法催化制备高光学纯(R)-DMPM的方法，通过固定化酯酶PAE选择性水解制备高光学纯(R)-MAP-acid，再通过有机相反应，使用固定化脂肪酶Novozym对第一步酶法制备的(R)-MAP-acid进行酶法甲酯化，通过脂肪酶Novozym的特异性来解决手性酸在化学甲酯化过程中出现的外消旋问题，最终制备得到高纯度的(R)-DMPM，为制备精甲霜灵重要中间体探索一条绿色生产路线。

本发明采用的技术方案是：