[发明专利]一种检测食品中羟基甲硝唑残留量的方法及产品

权利要求书

1.一种化合物，其结构如式I所示：

2.制备权利要求1所述化合物的方法，包括步骤为：

羟基甲硝唑原料1 g，用3 ml甲醇钠溶解，加入对苯二甲醛缩二乙醛1.38 g，搅拌，TLC检测反应完全时，加入盐酸淬灭反应，加入硅胶，进行柱层析拌样，旋干后进行柱层析，收集产物点，旋干得到中间体1，共725 mg；

将725 mg中间体1用盐酸溶液溶解，搅拌，监测反应完全，调PH值到7，旋干溶剂进行柱层析，展开剂比例为二氯甲烷：甲醇=10：1，收集所需溶液，旋干，得到中间体2，共526 mg；

称取526 mg中间体2，用乙醇溶解，加入羧甲基羟胺470 mg，搅拌，反应完全后，加入硅胶，进行柱层析，收集产物点，旋干溶剂，加入盐酸配置成羟基甲硝唑盐酸盐，得到488 mg羟基甲硝唑半抗原。

3.权利要求1所述式I所示羟基甲硝唑半抗原在制备羟基甲硝唑抗原中的应用；

含有权利要求1所述式I所示羟基甲硝唑半抗原化合物的羟基甲硝唑抗原。

4.根据权利要求3所述应用或羟基甲硝唑抗原，其特征在于：所述式I所示羟基甲硝唑半抗原化合物与载体蛋白偶联；所述载体蛋白具体为BSA或OVA。

5.根据权利要求4所述的羟基甲硝唑抗原，其制备方法包括如下步骤：

（1）将16.1mg羟基甲硝唑半抗原用1.5ml DMF溶解，200rpm搅拌10min，加入25.75mgEDC，15.46mg NHS溶解，室温搅拌（500rpm）活化2-3h，得到溶液I；

（2）将所述载体蛋白置于0.1M碳酸氢钠缓冲液中，200rpm搅拌10min，充分溶解，得到溶液II；所述载体蛋白与所述0.1M碳酸氢钠缓冲液的配比为33.6-50mg：3.5mL；

（3）将所述溶液I和所述溶液II混合，具体为在0-4℃条件下，1000rpm搅拌下，将溶液I逐滴加入到所述溶液II中，500rpm搅拌反应24h，得到溶液III；

（4）用0.01M pH7.2 PBS于4℃对所述溶液III搅拌透析3天，得到所述羟基甲硝唑抗原。

6.权利要求1所述式I所示羟基甲硝唑半抗原或权利要求4所述羟基甲硝唑抗原在制备抗体中的应用；由权利要求1所述式I所示羟基甲硝唑半抗原或由权利要求4所述羟基甲硝唑抗原作为免疫原制得的抗体。

7.权利要求1所述式I所示羟基甲硝唑半抗原或权利要求4所述羟基甲硝唑抗原或权利要求6所述抗体在检测羟基甲硝唑中的应用。

8.一种检测羟基甲硝唑的试剂盒，包括权利要求4所述羟基甲硝唑抗原和权利要求6所述抗体。

9.一种用于检测食品中羟基甲硝唑的方法，包括：用权利要求4所述羟基甲硝唑抗原或权利要求6所述抗体对食品进行检测；

或者，用权利要求8或9所述检测羟基甲硝唑的试剂盒对食品进行检测。

10.根据权利要求8所述的试剂盒或权利要求9所述的方法，其特征在于：所述试剂盒包括含不同梯度浓度羟基甲硝唑标准品工作液、包被羟基甲硝唑抗原的酶标板、酶标抗体工作液、抗体工作液、样品稀释液、洗涤液、底物显色液、终止液；

具体的，所述抗体工作液为将羟基甲硝唑单克隆抗体用抗体稀释液稀释90000倍获得的，所述抗体稀释液为：1 g环糊精、2 g BSA、35.82 g十二水合磷酸氢二钠、13.6 g磷酸二氢钾、5g氯化钠、1mL Tween-20，0.5 mL Proclin-300，加入100 mL 0.5 mol/L EDTA，900mL去离子水配制而成。