[发明专利]一种黄精植物甾醇多糖蛋白的制备方法及其活性制品

说明书

本发明公开一种黄精植物甾醇多糖蛋白的制备方法，以黄精植物发酵物进入肠胃道后的肝肠循环吸收后，由下腔动脉路径进入泌尿道系统血管循环引发的局部作用。为此，本发明所要解决的技术问题在于现有发酵技术中从发酵物分离多糖蛋白，并解决提取率较低，且生物活性不高的问题，同时，本发明还公开一种黄精植物甾醇多糖蛋白的活性制品，其具有促骨盆底骨骼肌强度，及抗血管收缩功效。

技术领域

本发明涉及天然植物提取物的技术领域，尤其涉及一种黄精植物甾醇多糖蛋白的制备方法及其活性制品。

背景技术

黄精(Polygonatum sibiricum Red.)为百合科植物的干燥根茎。黄精以根茎入药。具有补气養陰，健脾，润肺，益肾功能。用于治疗脾胃虚弱，体倦乏力，口干食少，肺虚燥咳，精血不足，内热消渴等症。性味甘,平，归肺，脾，肾经。用于阴虚肺燥，干咳少痰，及肺肾阴虚的劳嗽久咳，用于脾胃虚弱，既补脾阴，又益脾气，用于肾虚精亏得头晕，腰膝酸软，须发早白及消渴等。

发明内容

本发明的一个目的在于：提供一种黄精植物甾醇多糖蛋白的制备方法及其活性制品，用以解决现有技术存在的问题。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

一种黄精植物甾醇多糖蛋白的制备方法，包括以下步骤：

(1)预处理：取新鲜黄精根部，去除黄精表面的附着物，称重(湿重)并作为计量依据，将黄精切成丁状，粉碎后的黄精中加入4-8倍重量的水，使用匀浆机或胶体磨将粉碎的黄精顶制作成匀浆状；

(2)一次提取：采用过滤的方法将步骤(1)获得的黄精匀浆进行过滤，分别收集滤饼和滤液，滤液为第一次提取液；

(3)二次提取：将步骤(2)获得的黄精滤饼重新悬浮在3-5倍重量的水中，调节溶液pH至5.0-7.0，过滤后收集滤液，为第二次提取液；

(4)酶解：合并两次提取的滤液，加入0.1-5.0％黄精重量的复合酶解物，在30-50℃范围内搅拌6-12h；复合酶解物是由质量比为1-3：0.5-2的纤维素酶、木瓜蛋白酶组成。

(5)沉淀处理：将步骤(4)获得的酶解液调节pH至3.0-4.5并加入硫酸盐溶液，搅拌均匀，静置后使用离心法将滤液进行处理，收集滤液；

(6)干燥：将步骤(5)获得的滤液进行超滤处理，收集截留液，喷雾干燥，获得的粉末即为粗黄精多糖蛋白组合物。

作为一种优选的技术方案，在所述步骤(4)中，所述复合酶解物发酵产物的制备方法为：取经过清洗的菠萝原料，设定酶解条件为料液比1∶10(m/V)、纤维素酶CellulaseACCF-4740添加量2％、温度55℃、pH4.5、反应时间2.5h，进行酶解，纤维素酶水解结束后，沸水浴灭酶15min，9000r/min离心，收集上清液得到菠萝水解液；菠萝酶解液灭酶活后，调节pH值至6.2-6.6，高压蒸汽灭菌温度为121℃，时间为20min，然后接种体积分数1％的MRS培养基活化的戊糖片菌液到菠萝酶解液，37℃恒温培养箱静置，进行发酵；发酵结束后，9000r/min离心，收集上清液得到复合酶解物。

作为一种优选的技术方案，在所述步骤(4)中，酶解的原料是经过一次和二次提取后滤液的合并物。

作为一种优选的技术方案，在所述步骤(4)中，黄精多糖蛋白的制备方法为：提取液，4℃下提取44-50h，过滤，按0.5-1.5g/mL的添加量向滤液中缓慢添加硫酸铵，添加硫酸铵过程中不断搅拌，防止硫酸铵局部过饱和，然后静置45-50h，4℃条件下25000g离心5-10min，沉淀用酸性缓冲液复溶，4℃下分子量5000Da的透析袋透析，透析液经20000g离心10min，取上清液即为制备的扩张蛋白溶液；