[发明专利]一种黄精植物甾醇多糖蛋白的制备方法及其活性制品

权利要求书

1.一种黄精植物甾醇多糖蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)预处理：取新鲜黄精根部，去除黄精表面的附着物，称重(湿重)并作为计量依据，将黄精切成丁状，粉碎后的黄精中加入4-8倍重量的水，使用匀浆机或胶体磨将粉碎的黄精顶制作成匀浆状；

(2)一次提取：采用过滤的方法将步骤(1)获得的黄精匀浆进行过滤，分别收集滤饼和滤液，滤液为第一次提取液；

(3)二次提取：将步骤(2)获得的黄精滤饼重新悬浮在3-5倍重量的水中，调节溶液pH至5.0-7.0，过滤后收集滤液，为第二次提取液；

(4)酶解：合并两次提取的滤液，加入0.1-5.0％黄精重量的复合酶解物，在30-50℃范围内搅拌6-12h；复合酶解物是由质量比为1-3：0.5-2的纤维素酶、木瓜蛋白酶组成。

(5)沉淀处理：将步骤(4)获得的酶解液调节pH至3.0-4.5并加入硫酸盐溶液，搅拌均匀，静置后使用离心法将滤液进行处理，收集滤液；

(6)干燥：将步骤(5)获得的滤液进行超滤处理，收集截留液，喷雾干燥，获得的粉末即为粗黄精多糖蛋白组合物。

2.根据权利要求1所述的一种黄精植物甾醇多糖蛋白的制备方法，其特征在于，在所述步骤(4)中，所述复合酶解物发酵产物的制备方法为：取经过清洗的菠萝原料，设定酶解条件为料液比1∶10(m/V)、纤维素酶CellulaseACCF-4740添加量2％、温度55℃、pH4.5、反应时间2.5h，进行酶解，纤维素酶水解结束后，沸水浴灭酶15min，9000r/min离心，收集上清液得到菠萝水解液；菠萝酶解液灭酶活后，调节pH值至6.2-6.6，高压蒸汽灭菌温度为121℃，时间为20min，然后接种体积分数1％的MRS培养基活化的戊糖片菌液到菠萝酶解液，37℃恒温培养箱静置，进行发酵；发酵结束后，9000r/min离心，收集上清液得到复合酶解物。

3.根据权利要求1所述的一种黄精植物甾醇多糖蛋白的制备方法，其特征在于，在所述步骤(4)中，酶解的原料是经过一次和二次提取后滤液的合并物。

4.根据权利要求1所述的一种黄精植物甾醇多糖蛋白的制备方法，其特征在于，在所述步骤(4)中，黄精多糖蛋白的制备方法为：提取液，4℃下提取44-50h，过滤，按0.5-1.5g/mL的添加量向滤液中缓慢添加硫酸铵，添加硫酸铵过程中不断搅拌，防止硫酸铵局部过饱和，然后静置45-50h，4℃条件下25000g离心5-10min，沉淀用酸性缓冲液复溶，4℃下分子量5000Da的透析袋透析，透析液经20000g离心10min，取上清液即为制备的扩张蛋白溶液；

其中，匀浆缓冲液组分为：25mmol/L 4-羟乙基哌嗪乙磺酸，1.5mmol/L焦亚硫酸钠，2mmol/L EDTA，0.1wt％TritonX-100，pH7.0；提取液组分为：15mmol/L 4-羟乙基哌嗪乙磺酸，1.0mmol/L乙二胺四乙酸，1.5mmol/L焦亚硫酸钠，0.5mol/L NaCl，pH6.0；酸性缓冲液配制是：将2.5g醋酸钠溶于水中，用冰醋酸调节pH至4.0，水定容至1L。

5.根据权利要求1所述的一种黄精植物甾醇多糖蛋白的制备方法，其特征在于，在所述步骤(5)中，向溶液中加入的硫酸盐，可以是硫酸铁、硫酸锌或硫酸钠或混合使用。

6.一种黄精植物甾醇多糖蛋白的活性制品，其特征在于，包括以下重量份数计组分：马卡酵素提取物10-20份、黄精酵素提取物20-48份、枸杞酵素提取物15-25份、山药酵素提取物15-20份、啤酒酵母提取物3-8份、海藻糖提取物3-8份、南瓜子提取物15-30份、牛磺酸提取物4-8份、L-精氨酸提取物5-10份、麦芽糊精13-18份、硬脂酸镁0.2-1份。

7.根据权利要求6所述的一种黄精植物甾醇多糖蛋白的活性制品，其特征在于，所述活性制品的浓度为65％-88％。