[发明专利]一种利用修饰基底分离磷脂膜中胆固醇的方法

说明书

一种利用修饰基底分离磷脂膜中胆固醇的方法，它涉及一种分离胆固醇的方法。本发明的目的是要解决目前没有方法可以将磷脂膜中的胆固醇分离的问题。方法：一、玻璃基底表面疏水基团的修饰；二、基底上磷脂膜的铺展。本发明利用玻璃基底的特殊处理，构建不同程度的纳米级亲水和疏水结构域表面，实现铺展在表面上的磷脂膜中胆固醇的抽取分离，创建了磷脂膜中胆固醇分离的新方法，具有操作简单、反应条件温和、可控性好、耗时短、成本低等优点。本发明可以使胆固醇从磷脂膜中分离出来。本发明可获得一种利用修饰基底分离磷脂膜中胆固醇的方法。

技术领域

本发明涉及一种分离胆固醇的方法。

背景技术

膜结构是生物、医药和工业领域的重要组成部分，其中，由固体表面支撑构建的支撑磷脂双层膜是研究生物膜特性的最佳模型。

将磷脂膜中的胆固醇分离便于开展磷脂膜与基底的相互作用研究，膜的结构及性质等膜特性等研究。目前没有方法可以将磷脂膜中的胆固醇分离，因此，需要寻找一种具有操作简单、反应条件温和、可控性好、耗时短、成本低等优点的方法将磷脂膜中的胆固醇进行分离。

发明内容

本发明的目的是要解决目前没有方法可以将磷脂膜中的胆固醇分离的问题，而提供一种利用修饰基底分离磷脂膜中胆固醇的方法。

一种利用修饰基底分离磷脂膜中胆固醇的方法，具体是按以下步骤完成的：

一、玻璃基底表面疏水基团的修饰：

①、将疏水剂和甲苯混合均匀，得到疏水剂甲苯溶液；

②、将清洗干净的基底浸入到疏水剂甲苯溶液中组装4h～8h，取出后使用甲苯冲洗，再氮气吹干，得到表面组装疏水基团的基底，放入4℃冰箱保存备用；

二、基底上磷脂膜的铺展：

①、将表面组装疏水基团的基底置于等离子清洗机中氧化处理，得到含有纳米级亲水和疏水结构的基底；

②、首先将Tris缓冲液滴加到含有纳米级亲水和疏水结构的基底上，然后滴加磷脂囊泡溶液，磷脂囊泡下沉并与基底接触，破裂铺展在基底表面，最后使用Tris缓冲液冲洗掉剩余的磷脂囊泡，得到含有磷脂膜的基底；

③、将含有磷脂膜的基底在室温下继续孵育5min～120min，得到分离胆固醇后的磷脂膜。

本发明的原理及优点：

一、本发明利用玻璃基底的特殊处理，构建不同程度的纳米级亲水和疏水结构域表面，实现铺展在表面上的磷脂膜中胆固醇的抽取分离，创建了磷脂膜中胆固醇分离的新方法，具有操作简单、反应条件温和、可控性好、耗时短、成本低等优点；

二、有纹理表面特性的生物底物的普遍存在和广泛使用，本发明不仅在生物和化学科学领域的膜特性研究提供方案，在生物传感器和可调节的生物膜特性应用研究也具有参考意义，可用于细胞生物学、生物化学、仿生膜等领域的相关生物膜特性，细胞膜模拟等研究和应用；

三、使用本发明的方法，胆固醇从磷脂膜中分离率可达70％以上。

本发明可获得一种利用修饰基底分离磷脂膜中胆固醇的方法。

附图说明

图1为接触角对比图，图中1为实施例一中表面组装疏水基团的基底，2为使用等离子清洗机部分氧化处理后的基底；

图2为磷脂囊泡在铺展前后的荧光显微镜照片图，图中1为磷脂囊泡溶液，2为含有磷脂膜的基底；

图3为磷脂膜中胆固醇分离示意图，图中1为未处理的基底，2为表面组装疏水基团并经部分氧化处理的基底；

图4为接触角对比图，图中1为实施例二中表面组装疏水基团的基底，2为使用等离子清洗机部分氧化处理后的基底。

具体实施方式