[发明专利]紫地榆总鞣质对鼠急性胃溃疡保护作用的实验方法及应用

权利要求书

1.紫地榆总鞣质对鼠急性胃溃疡保护作用的实验方法，其特征在于：包括如下步骤：

步骤一、分组及造模

选取小鼠并随机分组，分别设置正常组、模型组、阳性对照组、紫地榆提取物低剂量组、紫地榆提取物中剂量组、紫地榆提取物高剂量组，适应性喂养一周后，正常组和模型组灌胃生理盐水(10mL/kg)，阳性对照组灌胃2.0mg/mL的奥美拉唑悬浊液，紫地榆低剂量组灌胃总鞣质25mg/kg，中剂量组灌胃总鞣质50mg/kg，高剂量组灌胃总鞣质100mg/kg，每天给药1次，连续给药7天，在第7天给药完成1h后，按400mg/kg的剂量灌胃阿司匹林溶液，灌胃前禁食不禁水24h；

步骤二、取材

灌胃阿司匹林溶液后，各组小鼠继续禁食禁水饲养4h，4h后，摘掉小鼠眼球取血，所取的血液静置2h后，在4℃，4000r/min速度下离心10min，收集血清，-20℃冰箱保存，再断颈处死小鼠，打开腹腔，取出胃，沿胃大弯剪开，用生理盐水洗净胃残留物，滤纸吸干，待测；

步骤三、溃疡指数评分

将各组小鼠洗净后的胃自然展开铺于白色洁净滤纸上，胃内面朝上，观察溃疡情况，拍照，用游标卡尺测量出血带长度和宽度；

步骤四、胃组织样本前处理

准确称取一半胃组织重量，按重量(g):体积(mL)＝1:9的比例，加入9倍体积的生理盐水，匀浆，以3000转/分的速度，离心10min，取上清液，-20℃冰箱保存，待测；

步骤五、胃组织匀浆中总蛋白浓度定量

精密量取步骤四中所得组织匀浆10μL于0.5mL离心管中，加入生理盐水190μL，用漩涡混匀器充分混匀，得到稀释20倍后的组织匀浆溶液，待测，采用BCA微板法，记录吸光度值，进行计算；

步骤六、胃组织中总超氧化物岐化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量测定

取胃组织匀浆，按试剂盒说明书操作步骤进行检测，记录吸光度值，进行计算；

步骤七、胃组织中前列腺素E2(PGE-2)、血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量测定

采用ELISE法，按说明书所列流程测定组织中前列腺素E2(PGE-2)、血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量；

步骤八、统计

采用SPSS 20.0统计软件进行分析，阿司匹林致小鼠急性胃溃疡和无水乙醇致小鼠急性胃溃疡阳性药组、紫地榆提取物低剂量组、紫地榆提取物中剂量组、紫地榆提取物高剂量组分别与正常组和模型组比较，采用单因素方差分析(One-WayANOVA)，用P＜0.05代表具有显著统计学差异，P＜0.01代表具有极显著统计学差异。

2.紫地榆总鞣质对鼠急性胃溃疡保护作用的实验方法的应用，其特征在于：应用于紫地榆总鞣质对胃溃疡保护作用实验。