[发明专利]一组用于等温核酸扩增检测人乳头瘤病毒6型和/或11型的引物探针组合、试剂盒及应用有效
| 申请号: | 202110911629.1 | 申请日: | 2021-08-10 |
| 公开(公告)号: | CN113584229B | 公开(公告)日: | 2023-08-22 |
| 发明(设计)人: | 马学军;申辛欣;张瑞卿;何安娜 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 张梦泽 |
| 地址: | 102206 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一组 用于 等温 核酸 扩增 检测 乳头 病毒 11 引物 探针 组合 试剂盒 应用 | ||
1.一组用于等温核酸扩增检测人乳头瘤病毒6型和/或11型的引物探针组合,其特征在于,包括第一引物探针组和/或第二引物探针组;所述第一引物探针组包括针对HPV6的特异性引物对和针对HPV6的靶基因探针;所述第二引物探针组包括针对HPV11的特异性引物对和针对HPV11的靶基因探针;
所述针对HPV6的特异性引物对包括正向引物和反向引物;所述正向引物包括如SEQ IDNo.2所示的核苷酸序列;所述反向引物包括如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列;所述针对HPV6的靶基因探针包括如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列;
所述针对HPV11的特异性引物对包括正向引物和反向引物;所述正向引物包括如SEQID No.10所示的核苷酸序列;所述反向引物包括如SEQ ID No.11所示的核苷酸序列;所述针对HPV11的靶基因探针包括如SEQ ID No.9所示的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的引物探针组合,其特征在于,所述针对HPV6的特异性引物对的靶基因包括如SEQ ID No.8所示的核苷酸序列;所述针对HPV11的特异性引物对的靶基因包括如SEQ ID No.16所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求1所述的引物探针组合,其特征在于,还包括内源性内参引物探针组;所述内源性内参引物探针组包括内源性内参探针和内源性内参引物对;所述内源性内参探针包括如SEQ ID No.17所示的核苷酸序列;所述内源性内参引物对的正向引物包括如SEQID No.18所示的核苷酸序列;所述内源性内参引物对的反向引物包括如SEQ ID No.19所示的核苷酸序列。
4.根据权利要求3所述的引物探针组合,其特征在于,所述内源性内参引物对的靶基因包括如SEQ ID No.20所示的核苷酸序列。
5.根据权利要求3所述的引物探针组合,其特征在于,所述内源性内参探针的类型包括exo探针。
6.权利要求1~5任一项所述的引物探针组合在制备用于检测人乳头瘤病毒6型和/或11型的工具中的应用。
7.一种用于检测人乳头瘤病毒6型和/或11型的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1~5任一项所述的引物探针组合。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,针对HPV6的靶基因探针、针对HPV11的靶基因探针和内源性内参探针分别标记荧光不同的荧光基团;所述荧光基团包括FAM、HEX、ROX、TET、JOE、CY3、CY5、TAMRA或VIC。
9.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的恒温扩增的温度为39~42℃;所述试剂盒的恒温扩增的时间为15~30min。
10.权利要求7~9任一项所述的试剂盒在非诊断目的检测人乳头瘤病毒6型和/或11型的应用,其特征在于,当检测HPV6时,将第一引物探针组和内源性内参引物探针组进行组合使用;当检测HPV11时,将第二引物探针组和内源性内参引物探针组进行组合使用;当同时检测HPV6和HPV11时,将第一引物探针组和第二引物探针组进行组合使用,同时,将内源性内参引物探针组单独设置一管,作为内参。
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