[发明专利]一种乳腺癌靶标抗原、乳腺癌靶标抗原刺激培养的CTL细胞及其应用

说明书

本发明提供了一种乳腺癌靶标抗原、乳腺癌靶标抗原刺激培养的CTL细胞及其应用，属于肿瘤治疗技术领域。本发明中所述乳腺癌靶标抗原的氨基酸序列如SEQ ID No.17所示；本发明所述的乳腺癌靶标抗原是基于患者肿瘤组织的全外显子检测结果，通过预测分析、筛选获得的有效的肿瘤抗原，利用所述乳腺癌靶标抗原培养获得的CTL细胞，对肿瘤具有特异性的杀伤作用；本发明提供的乳腺癌靶标抗原可以应用于乳腺癌的治疗。

本申请是申请日为2020年03月18日、申请号为202010190790.X、发明名称为《一种乳腺癌靶标抗原组合、乳腺癌靶标抗原组合刺激培养的CTL细胞及其应用》的分案申请。

技术领域

本发明属于肿瘤治疗技术领域，尤其涉及一种乳腺癌靶标抗原组合、乳腺癌靶标抗原组合刺激培养的CTL细胞及其应用。

背景技术

女性乳腺是由皮肤、纤维组织、乳腺腺体和脂肪组成的，乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。乳腺癌中99％发生在女性，男性仅占1％。

随着对乳腺癌生物学行为认识的不断深入，以及治疗理念的转变与更新，乳腺癌的治疗进入了综合治疗时代，形成了乳腺癌局部治疗与全身治疗并重的治疗模式。医生会根据肿瘤的分期和患者的身体状况，酌情采用手术、放疗、化疗、内分泌治疗、生物靶向治疗及中医药辅助治疗等多种手段。

随着精准治疗的推广，常规的化疗、放疗和靶向已无法满足肿瘤的个性化和多变性，因此，寻找个性化的肿瘤新抗原，培养识别个性化肿瘤新抗原的CTL，将是彻底清除肿瘤的有效方法。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种乳腺癌靶标抗原组合、乳腺癌靶标抗原组合刺激培养的CTL细胞及其应用；本发明提供的乳腺癌靶标抗原组合是基于患者肿瘤组织的全外显子检测结果，通过预测分析、筛选获得的有效的肿瘤抗原，利用所述乳腺癌靶标抗原组合培养获得的CTL细胞，对肿瘤具有特异性的杀伤作用；本发明提供的乳腺癌靶标抗原特异性针对同一种HLA类型的乳腺癌，实现个性化治疗。

本发明提供了一种乳腺癌靶标抗原组合，包括氨基酸序列如SEQ ID No.1、SEQ IDNo.6、SEQ ID No.8、SEQ ID No.9和SEQ ID No.17所示的抗原中的一种或几种。

本发明提供了所述的乳腺癌靶标抗原组合在制备治疗乳腺癌的药物中的应用。

本发明提供了所述的乳腺癌靶标抗原组合在制备治疗乳腺癌的CTL细胞中的应用。

本发明提供了一种CTL细胞，所述CTL细胞为所述的乳腺癌靶标抗原组合刺激培养的CTL细胞。

本发明提供了所述的CTL细胞的制备方法，包括以下步骤：

1)将CTL细胞浓度调整至2～3×10⁵cells/mL；

2)将调整细胞浓度后的CTL细胞、IL-2和所述的乳腺癌靶标抗原组合混合获得培养体系；

3)将所述培养体系进行培养获得乳腺癌靶标抗原组合刺激培养的CTL细胞。

优选的，IL-2在培养体系中的终浓度为150～250U/mL。

优选的，所述的乳腺癌靶标抗原组合中每一种乳腺癌靶标抗原在培养体系中的终浓度为40～60ng/mL。

优选的，步骤3)中所述培养的温度为36～38℃，所述培养的时间为22～26h。

优选的，步骤1)中所述的CTL细胞是通过PBMC细胞与APC细胞共培养获得。

本发明提供了所述的CTL细胞在制备治疗乳腺癌药物中的应用。