[发明专利]用于检测ALDH2基因的方法、试剂盒、引物对、探针、基因芯片及应用

权利要求书

1.一种用于检测ALDH2基因的试剂盒，其特征在于，其包括PCR反应体系和基因芯片，所述PCR反应体系包括由一上游引物和一下游引物组成的引物对，所述基因芯片包括探针；其中，

所述引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；

和/或，所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和/或SEQ ID NO.4所示。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应体系中的引物的浓度均为0.06～0.76μM，较佳地为0.18～0.76μM，更佳地为0.24～0.76μM；

和/或，所述基因芯片中的探针的浓度为1.67～20μM，较佳地为5μM。

3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述引物对为5’端有生物检测标记物修饰的引物对，所述生物检测标记物优选为生物素、地高辛、荧光素、荧光素衍生物、荧光分子、碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶；

和/或，所述探针为5’端由一基团修饰的探针，所述基团与基因芯片的固相支持物相结合，优选由一氨基修饰的探针，更优选由一氨基和多个碱基T修饰的探针，进一步更优选由一氨基和16个碱基T修饰的探针；

和/或，所述PCR反应体系还包括强耐受性DNA聚合酶，所述强耐受性DNA聚合酶优选Direct PCR Mix、TransDirect^TM PCR SuperMix、Phusion Blood Direct PCR Master Mix中的一种或多种；

和/或，用于所述试剂盒的待测样品为含基因组DNA的生物样本，优选全血或口腔黏膜脱落细胞。

4.如权利要求1～3任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应体系还包括PCR反应缓冲液和/或脱氧核苷三磷酸；

和/或，所述试剂盒中还包括阴性探针，其核苷酸序列优选如SEQ ID No.5所示。

5.如权利要求1～4任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括杂交溶液，所述杂交溶液优选包括杂交缓冲液、预杂交液和/或洗液；和/或，所述试剂盒还包括能够与所述引物对的检测标记物发生反应的溶液和显色液，所述显色液例如四氮唑蓝、5-溴-4-氯-3-吲哚酚-磷酸-4-甲苯胺盐或四甲基联苯胺。

6.一种检测ALDH2基因的引物对，其特征在于，所述的引物对的核苷酸序列如SEQ IDNO.1和SEQ ID NO.2所示；

较佳地，所述的检测为PCR检测，和/或，所述检测的样品为含基因组DNA的生物样本，优选全血或口腔黏膜脱落细胞。

7.一种检测ALDH2基因的探针，其特征在于，所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和/或SEQ ID NO.4所示；

较佳地：

所述探针被固定在基因芯片的固相支持物上；和/或，所述的检测为PCR检测；和/或，所述检测的样品为含基因组DNA的生物样本，优选为全血或口腔黏膜脱落细胞。

8.一种基因芯片，其特征在于，所述基因芯片包括固相支持物以及被固定在所述固相支持物上的如权利要求7所述的探针。

9.如权利要求6所述的引物对和/或权利要求7所述的探针在检测ALDH2基因、制备检测ALDH2基因的试剂或试剂盒中的应用。