[发明专利]一种哺乳动物胚胎的性别鉴定方法在审
申请号: | 202110854857.X | 申请日: | 2021-07-28 |
公开(公告)号: | CN113584141A | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
发明(设计)人: | 高庆华;方翟;陶维昆 | 申请(专利权)人: | 塔里木大学 |
主分类号: | C12Q1/6879 | 分类号: | C12Q1/6879;C12Q1/686 |
代理公司: | 北京鼎佳达知识产权代理事务所(普通合伙) 11348 | 代理人: | 孟阿妮;张小勇 |
地址: | 843300 新疆维吾尔自治区阿*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 哺乳动物 胚胎 性别 鉴定 方法 | ||
1.一种哺乳动物胚胎的性别鉴定方法,其特征在于,所述的性别鉴定方法包括以下步骤:
(1)获取胚胎;
(2)获取胚胎细胞基因组DNA;
(3)设计与合成引物;
(4)QPCR反应:在PCR反应体系中,加入荧光染料;
(5)扩增曲线并分析后,鉴定胚胎性别。
2.根据权利要求1所述的性别鉴定方法,其特征在于,
所述的步骤(5)中,扩增曲线后,有雄性特异基因扩增曲线的胚胎为雄性,否则为雌性。
3.根据权利要求1所述的性别鉴定方法,其特征在于,
所述的扩增曲线为胚胎DNA扩增曲线、胚胎DNA溶解曲线中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的性别鉴定方法,其特征在于,
所述的步骤(4)中,QPCR反应的扩增条件为:在95℃下预变性30s后,95℃变性10s,再在65℃退火延伸20s,该过程循环40次。
5.根据权利要求4所述的性别鉴定方法,其特征在于,
所述的步骤(4)中,每10μL的PCR反应体系为:2×S6 Universal SYBR qPCR Mix 5μL,上、下游引物各0.25μL,DNA模板1μL,dd H2O 3.5μL。
6.根据权利要求1所述的性别鉴定方法,其特征在于,
所述的胚胎为活体采胚、或经体外受精产生的胚胎、或冻胚。
7.根据权利要求1所述的性别鉴定方法,其特征在于,
所述的性别鉴定方法用于鉴定绵羊胚胎。
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