[发明专利]一种检测mRNA加帽效率的方法在审
| 申请号： | 202110831299.5 | 申请日： | 2021-07-22 |
| 公开（公告）号： | CN115678968A | 公开（公告）日： | 2023-02-03 |
| 发明（设计）人： | 董翊洁 | 申请（专利权）人： | 仁景（苏州）生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6813 | 分类号： | C12Q1/6813 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 何叶喧 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州市自由贸易试验区苏州片区苏州工*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 mrna 效率 方法 | ||
1.一种检测mRNA加帽效率的方法，依次包括如下步骤：
(1)将供试mRNA与DNA探针杂交；所述DNA探针为单链DNA分子，由15-25个核苷酸组成，与所述供试mRNA的5’UTR中的特异区段反向互补；所述特异区段位于所述供试mRNA的5’UTR的5’末端第10-85位核苷酸区间中；
(2)进行RNase酶解；所述RNase具有特异性切割由DNA和RNA形成的杂合双链中的RNA的功能；
(3)进行DNase酶解；
(4)进行毛细管电泳，计算加帽效率。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述RNase为RNaseH。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述方法中，供试mRNA和DNA探针的配比为：2μg：10-30pmol。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述方法中，供试mRNA和DNA探针的配比为：2μg：20pmol。
5.组件甲、组件乙、组件丙和组件丁在制备试剂盒中的应用；
所述试剂盒的功能为检测mRNA加帽效率；
所述组件甲为DNA探针；所述DNA探针为单链DNA分子，由15-25个核苷酸组成，与所述供试mRNA的5’UTR中的特异区段反向互补；所述特异区段位于所述供试mRNA的5’UTR的5’末端第10-85位核苷酸区间中；
所述组件乙为RNase；所述RNase具有特异性切割由DNA和RNA形成的杂合双链中的RNA的功能；
所述组件丙为DNase；
所述组件丁为用于进行毛细管电泳的试剂或试剂套装。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于：所述RNase为RNaseH。
7.一种试剂盒，包括组件甲、组件乙、组件丙和组件丁；
所述组件甲为DNA探针；所述DNA探针为单链DNA分子，由15-25个核苷酸组成，与所述供试mRNA的5’UTR中的特异区段反向互补；所述特异区段位于所述供试mRNA的5’UTR的5’末端第10-85位核苷酸区间中；
所述组件乙为RNase；所述RNase具有特异性切割由DNA和RNA形成的杂合双链中的RNA的功能；
所述组件丙为DNase；
所述组件丁为用于进行毛细管电泳的试剂或试剂套装。
8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于：所述RNase为RNaseH。
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