[发明专利]寡糖标志物及其在燕窝鉴定中的应用

权利要求书

1.一种鉴别燕窝的方法，包括：

a.对燕窝样品中的碳水化合物进行检测；

b.鉴定燕窝样品中碳水化合物的一种或者多种寡糖标志物。

2.权利要求1所述的鉴别燕窝的方法，其中，所述检测方法选自色谱分析法、光谱分析法、质谱分析法、色谱联用分析法、色谱-光谱联用分析法、色谱-质谱联用分析法、毛细管电泳分析法、免疫分析法、核酸适配子结合分析法及其组合；

优选地，所述免疫分析法包括：特异性抗体分析法、ELISA分析法或胶体金法；

优选地，所述光谱分析法包括：核磁共振光谱分析法(NMR)、紫外分光光度法、近红外分光光度法、X射线粉末衍射法、拉曼光谱分析法、傅里叶变换红外光谱法；

优选地，所述色谱分析以及联用分析法包括：薄层色谱分析法、气相色谱分析法(GC)，高效液相色谱分析法(HPLC)、液相色谱分析法、亲水相互作用色谱分析法、凝胶渗透色谱分析法、离子色谱分析法、色谱-质谱联用分析法例如液相色谱-质谱联用法(LC-MS)、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)、气相色谱-红外光谱联用法、气相色谱-液相色谱联用法、液相色谱-核磁共振联用法；

更优选地，所述检测方法为液相色谱-质谱联用法，特别优选LC-DAD-Q-TOF-MS法、液相色谱-三重四极杆串联质谱(LC-QqQ-MS/MS)。

3.权利要求1～2中任一项所述的鉴别燕窝的方法，其中，所述液相色谱的色谱条件为：所述液相色谱的色谱柱选自硅胶基质色谱柱、聚合物基质色谱柱、或者其他无机填料色谱柱；

优选地，使用C18十八烷基键合硅胶液相色谱柱、C8辛烷键合硅胶液相色谱柱、NH2氨基键合硅胶色谱柱、二醇基键合硅胶色谱柱、苯基键合硅胶色谱柱、离子交换色谱柱或者酰胺基键合硅胶色谱柱；

更优选地，使用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱或者Waters UPLC XBridge BEH Amide色谱柱。

4.权利要求1～3中任一项所述的鉴别燕窝的方法，其中，所述液相色谱的色谱条件为：所述液相色谱的流动相选自水、甲酸、乙酸、乙腈、异辛烷、正己烷、正葵烷、环己烷、二硫化碳、四氯化碳、苯、二甲苯、甲苯、氯苯、二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、氯仿、苯胺、吡啶、丙酮、甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇或其组合；

优选地，所述液相色谱的流动相选自水、甲酸、乙酸、乙腈或其组合；

更优选地，所述液相色谱的流动相为：0.1％～0.5％甲酸水溶液和0.1％～0.5％甲酸乙腈溶液。

5.权利要求1～4中任一项所述的鉴别燕窝的方法，其中还包括在进行样品鉴定前将燕窝样品制备为样品溶液的步骤；

优选地，采用水性溶剂制备样品溶液，更优选地，所述水性溶剂为甲醇或水，尤其优选地，所述水性溶剂是甲醇：水体积比为0％～70％的水性溶剂。

6.权利要求1～5中任一项所述的鉴别燕窝的方法，其中还包括将燕窝样品进行柱前衍生化的步骤；

优选地，包括采用2-AA、2-AB、PMP、2-AP、ABP、ABME、HOA、AMAC、3-(乙酰氨基)-6-氨基-吖啶(AA-Ac)，ANTS、苯肼或丹磺酰肼进行衍生化的步骤；

优选地，包括采用ABEE进行衍生化的步骤。

7.权利要求1～6中任一项所述的鉴别燕窝的方法，其包括以下步骤：

(1)制备样品溶液；

(2)将步骤(1)中的样品溶液用ABEE进行衍生化；

(3)使用液相色谱-质谱联用法对衍生化样品进行分离与检测，得到样品的保留时间与质荷比；

(4)将样品的保留时间与质荷比与标志物对比，进行样品的鉴定。