[发明专利]CTRP3蛋白的抗瘤作用及编码其的重组溶瘤病毒及制备方法和应用

说明书

本发明公开了CTRP3蛋白的抗瘤作用及编码其的重组溶瘤病毒及制备方法和应用，涉及基因治疗领域，通过将抑制肿瘤生长的CTRP3基因插入病毒基因组中来进行病毒复制，编码生成CTRP3。本发明将恶性肿瘤的基因治疗与病毒治疗有效结合起来，制备了可高效表达CTRP3的重组溶瘤病毒，相对于单纯的基因疗法或病毒疗法增强了对肿瘤的杀伤能力。

技术领域

本发明涉及基因治疗领域，特别涉及CTRP3蛋白的抗瘤作用及编码其的重组溶瘤病 毒及制备方法和应用，通过将抑制肿瘤生长的CTRP3基因插入病毒基因组中来进行病毒复制，编码生成CTRP3，CTRP3表达量增加提高了重组溶瘤病毒抗癌防癌的效率。

背景技术

C1q肿瘤坏死因子(TNF)相关蛋白3(CTRP3)是一种新近发现的脂肪因子，属于C1q/TNF超家族，与脂联素有高度同源性。CTRP3以内分泌的方式对心血管、代谢、炎 症等相关疾病发挥多种作用。但是，CTRP3在肿瘤方面基本没有报告，本研究发现CTRP3 能够有效地抑制肿瘤的生长。因此，利用溶瘤病毒携带CTRP3治疗肿瘤有望成为一种新 的可能性。

溶瘤病毒治疗作为一种新起的生物免疫治疗方式，可以通过直接的溶瘤作用和诱导 机体的免疫活性发挥抗肿瘤作用。而后，随着“癌症的靶向基因病毒治疗(cancertargeting gene virotherapy，CTGVT)”策略(即在溶瘤病毒载体上插入抗癌基因，将病毒治疗与基因治 疗有机结合，成为具有很强杀伤作用的基因病毒治疗手段)的提出，装载了靶向基因或细 胞因子的溶瘤病毒在肿瘤靶向治疗上取得了极大的成功。溶瘤痘苗病毒(Oncolytic Vaccinia Virus)是病毒治疗的新型载体，其优点在于：病毒稳定性好、致病性低、基因转 染效力高、安全性良好。溶瘤痘苗病毒能选择性感染肿瘤细胞并在细胞内复制、杀死肿 瘤细胞，而对正常组织和细胞的毒性很小。

因此研究CTRP3抑制肿瘤生长的作用机理，并运用在治疗肿瘤或癌症中是当前研究 的热点和难点。

发明内容

现有技术中的治疗癌症的方法效果较弱。为此，本发明要解决的技术问题是提供一 种治疗癌症或者肿瘤的新方法，即，CTRP3蛋白的抗瘤作用及编码其的重组溶瘤病毒及制备方法和应用。具体而言，包括插入外源基因序列编码CTRP3基因的重组溶瘤病毒施 用于受试者。另一方面，本发明提供了以上重组溶瘤病毒在制备用于治疗癌症或/和肿瘤 的药物组合物中的用途。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

CTRP3蛋白或编码所述CTRP3蛋白的基因在预防或治疗肿瘤和/或癌症中应用。

由于目前CTRP3在肿瘤方面的研究基本没有报告，而本研究首次发现CTRP3能够有效地抑制肿瘤的生长。

本发明是通过以下的技术方案实现的：

本发明还提供一种重组溶瘤病毒，所述重组溶瘤病毒可操作的插入外源基因序列， 所述外源基因序列编码生成CTRP3蛋白。

优选的，所述外源基因序列插入TK基因中。TK基因(Thymidine kinase gene,TK)是 胸腺嘧啶核苷激酶基因，TK基因参与细胞增殖过程中的DNA合成，溶瘤病毒复制时， 在TK的作用下可形成一个高浓度的核苷酸池，以确保子代DNA复制的顺利进行。正常 细胞中，核苷酸的浓度较低，因此TK是正常细胞增殖所必需的；肿瘤细胞中则具有较高 浓度的核苷酸，因此TK对于肿瘤细胞增殖是非必需的。由上可知，溶瘤病毒能够优先在 为其提供足够核苷酸的肿瘤细胞中复制，而不能在正常细胞中复制，删除TK基因可以加 强溶瘤病毒在肿瘤细胞内复制的特性。我们应用基因重组技术将外源基因片段插入TK基 因序列中，使得溶瘤病毒载体缺失TK序列，在此基础上进一步构建携带外源基因的溶瘤 痘苗病毒，降低了重组溶瘤病毒对正常细胞的破坏，提高了对肿瘤细胞的特异性识别， 从而提高了治疗效率，降低了副作用。