[发明专利]一种检测2019-nCoV的CDA引物组、试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种非疾病诊断目的的检测2019-nCoV的CDA引物组，其特征在于：所述CDA引物组为针对2019-nCoV的S区片段扩增的引物组和/或N区片段扩增的引物组；

其中，所述针对2019-nCoV的S区片段扩增的引物组包括一对引物，分别为：S-MF：其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，S-MR：其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；

其中，所述针对2019-nCoV的N区片段扩增的引物组包括一对引物，分别为：N-MF：其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，N-MR：其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

2.一种检测2019-nCoV的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括权利要求1所述的CDA引物组。

3.如权利要求2所述的一种检测2019-nCoV的试剂盒，其特征在于：所述CDA引物组中各引物S-MF、S-MR、N-MF、N-MR在反应体系中的浓度均为1～2μM。

4.如权利要求2所述的一种检测2019-nCoV的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括Bst聚合酶、AMV反转录酶、CDA反应缓冲液、超纯水、以及显色剂。

5.如权利要求4所述的一种检测2019-nCoV的试剂盒，其特征在于：所述显色剂选自Sybr green I、Eva green、羟基萘酚蓝、铬黑T中的一种。

6.如权利要求4所述的一种检测2019-nCoV的试剂盒，其特征在于：所述CDA反应缓冲液包括Tris-HCl、KCl、(NH₄)₂SO₄、MgSO₄和Triton X-100。

7.如权利要求2所述的一种检测2019-nCoV的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒反应体系的组成为，

2-50mM Tris-HCl pH8.8

2-20mM KCl

2-20mM(NH₄)₂SO₄

2～20mM MgSO₄

0.1～0.5％Triton X-100

0.2～1M甜菜碱

1～1.6mM dNTP

5～10U Bst DNA聚合酶

5～10U AMV反转录酶

100～150μmol/L显色剂

2～4μM引物S-MF/S-MR或N-MF/N-MR；

反应溶剂为超纯水。

8.权利要求7所述的试剂盒非疾病诊断目的的检测2019-nCoV的方法，包括以下步骤：

步骤1，将待检测核酸样本和试剂盒的反应体系混合，制得扩增反应液；

步骤2，上述制得的扩增反应液，在35～45℃恒温反应5～10min，然后60～65℃反应20～80min，根据显色结果判断样品是否含有2019-nCoV。

9.权利要求1所述的CDA引物组在非疾病诊断目的的2019-nCoV病毒检测中的应用。

10.权利要求2-7任一项所述的试剂盒在非疾病诊断目的的2019-nCoV病毒检测中的应用。