[发明专利]一种预测儿童哮喘发作的组合试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种预测儿童哮喘发作的组合试剂盒及其应用，本发明通过采集哮喘患儿急性期、缓解期外周血，经TMT ^TM标记的定量蛋白质组学技术检测，生物信息学分析差异表达的蛋白质，获得目标蛋白、建库，然后再经PRM靶向蛋白质组学技术对靶标蛋白进行定量分析，获得一个血浆蛋白标志物组合，通过用ELISA方法检测哮喘患儿外周血清确定各标志物及其组合在临床上的应用价值，在此基础上，本发明通过了一种组合试剂盒用于检测血浆标志物组合，通过该检测结果来预测哮喘发作，该预测结果具有较高的诊断灵敏度和特异度，有望成为哮喘发作的实验室诊断指标。

技术领域

本发明属于生物医药开发技术领域，尤其涉及一种预测儿童哮喘发作的组合试剂盒及其应用。

背景技术

哮喘是一种慢性气道疾病，表现为可逆性气流阻塞、呼吸困难、喘息、咳嗽、不同程度的气道炎症和支气管高反应性等。尽管人们已经在数百年前就知道哮喘病，但是仍然没有金标准用于哮喘病诊断。

气道高反应性(airway hyperresponsiveness，AHR)检测有助于有症状患者的诊断，但是AHR的作用是有限的：尽管AHR检测可用于排除哮喘，但是对于非哮喘患者，对于无症状但有变应性炎症患者，其气道也呈高反应性。有报道20％～30％成人哮喘患者为过度诊断。

纤维支气管镜曾经被认为是诊断哮喘病最重要的手段，尽管其能够精确地侵入气道进行检测，但是价格昂贵、操作繁琐，稍微操作不当就会造成组织穿孔和出血，不能实施批量检测，也不能在初级医疗机构常规开展。

长期以来，寻找血清学指标成为诊断哮喘病的重要研究方向之一，因为外周血样本容易获得，容易在临床推广应用。迄今为止，任何单个血清标志物均不能用于准确判断患者病情程度。尽管文献报道了许多血清标志物用于哮喘病诊断，但是其临床转化应用鲜见报道。数个队列研究使用数据驱动的方法(data-driven approaches)鉴定出不同临床表型的哮喘患者，但是不同研究获得的危险因素不一致，即设定的同一表型仍然具有异质性；数个文献使用数据驱动技术辨别不同表型哮喘病的治疗效果，结果表明它们的治疗效果相似。敏感度好、特异度好的血清标志物不仅可以鉴别不同表型的儿童哮喘，还有助于个性化用药的选择，以及预测治疗效果。因此，全面系统阐述哮喘发生发展，包括临床症状、与遗传相关的血清标志物、与肺功能相关的血清标志物，对有助于开发更加有效的治疗策略。

蛋白质组学(Proteome)概念诞生于20世纪90年代，是指利用高分辨的蛋白质分离技术和高效的蛋白质鉴定技术在蛋白质水平全面、动态和定量地观察生命现象及规律，包括蛋白质的表达水平、翻译后修饰、蛋白质与蛋白质的相互作用，对映于基因组表达的所有蛋白质的集合，即细胞、组织或机体全部蛋白质的存在及其活动方式。TMT技术是常用的差异蛋白质组学技术，比较不同样品中差异表达的蛋白质，在疾病标记物筛选、药物作用靶点等领域都有广泛应用。PRM是一种基于高分辨、高精度质谱的离子监视技术，能够对目标蛋白质、目标肽段进行选择性检测，从而实现对目标蛋白质/肽段进行绝对定量。

发明内容

本发明的首要目的在于提供一种预测儿童哮喘发作的组合试剂盒。

本发明的再一目的在于提供上述组合试剂盒在作为预测儿童哮喘发作的试剂中的应用。

本发明是这样实现的，一种预测儿童哮喘发作的组合试剂盒，该组合试剂盒由若干分别用于检测抗人α-1抗胰糜蛋白酶(AACT)、血清免疫球蛋白A(IgA)、血清淀粉样蛋白A(SAA)、血红蛋白(HBB)的子试剂盒构成。