[发明专利]一种同时定量检测血清中3种急性心肌梗死相关microRNA荧光探针的制备方法

权利要求书

1.一种同时定量检测血清中3种急性心肌梗死相关microRNA荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤如下：

(1)、合成金属有机骨架Fe-MIL-88；

(2)、制备发夹探针H1,H2,H3,H4,H5,H6,H7,H8,H9：将H1-H9于95℃反应，然后自然冷却至室温；

(3)、制备荧光探针：将步骤(2)所得的发夹探针与步骤(1)所得的Fe-MIL-88混合，发夹探针上标记的FAM(H1-H3),TAMRA(H4-H6),Cy5(H7-H9)的荧光被猝灭，随着目标物的加入，520nm处FAM的荧光随着目标物microRNA-21浓度逐渐增加而逐渐增强，580nm处TAMRA的荧光随着目标物microRNA-499浓度逐渐增加而逐渐增强，680nm处Cy5的荧光随着目标物microRNA-133a浓度逐渐增加而逐渐增强；

(4)、根据荧光强度对相应目标物的浓度绘制标准曲线；

(5)、根据标准曲线，获得样品中microRNA-21,microRNA-499,microRNA-133a的浓度，完成对3种microRNA的定量检测。

2.根据权利要求1所述的一种同时定量检测血清中3种急性心肌梗死相关microRNA荧光探针的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，金属有机骨架Fe-MIL-88的紫外吸收波长为400-800nm。

3.根据权利要求1所述的一种同时定量检测血清中3种急性心肌梗死相关microRNA荧光探针的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，发夹探针与Fe-MIL-88培育时间为0-40min且大于0。

4.根据权利要求1所述的一种同时定量检测血清中3种急性心肌梗死相关microRNA荧光探针的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，目标物与发夹探针培育时间为0-120min且大于0。

5.根据权利要求1所述的一种同时定量检测血清中3种急性心肌梗死相关microRNA荧光探针的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，Fe-MIL-88浓度为175-525μg/mL。

6.根据权利要求1所述的一种同时定量检测血清中3种急性心肌梗死相关microRNA荧光探针的制备方法，其特征在于：步骤(4)中，根据520nm处荧光强度对microRNA-21的浓度绘制标准曲线，根据580nm处荧光强度对microRNA-499的浓度绘制标准曲线，根据680nm处荧光强度对microRNA-133a的浓度绘制标准曲线。