[发明专利]一种用于检测日本鲭的实时荧光PCR引物和探针以及试剂盒有效
申请号: | 202110784627.0 | 申请日: | 2021-07-12 |
公开(公告)号: | CN113337618B | 公开(公告)日: | 2022-11-22 |
发明(设计)人: | 刘立兵;王建昌;娄巧哲;王金凤;孙晓霞;付琦 | 申请(专利权)人: | 石家庄海关技术中心 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 河北国维致远知识产权代理有限公司 13137 | 代理人: | 任青 |
地址: | 050051 河*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 日本 实时 荧光 pcr 引物 探针 以及 试剂盒 | ||
1.一种用于检测日本鲭的实时荧光PCR引物和探针,其特征在于:所述引物的序列为:
上游引物:5′-TTGCCCTTGGAGTTCGACTAAC-3′;
下游引物:5′-GCAGCTGTTGCGATTAGTTGAA-3′;
所述探针的序列为:5′-CCAACCTTACAGCCGGCCACCTTC-3′;
其中,所述探针的5′连接有荧光基团,所述探针的3′端连接有淬灭基团。
2.如权利要求1所述的用于检测日本鲭的实时荧光PCR引物和探针,其特征在于:所述荧光基团为FAM,所述淬灭基团为BHQ1。
3.一种用于检测日本鲭的试剂盒,其特征在于:包括权利要求1或2所述的引物和探针。
4.如权利要求3所述的用于检测日本鲭的试剂盒,其特征在于:还包括DNA聚合酶、缓冲液、dNTP和去离子水。
5.权利要求3或4所述的用于检测日本鲭的试剂盒的使用方法,其特征在于:提取待测样品的基因组为模板,用所述试剂盒进行实时荧光PCR扩增,并在扩增过程中进行实时荧光检测。
6.如权利要求5所述的用于检测日本鲭的试剂盒的使用方法,其特征在于:所述实时荧光PCR扩增的体系包括以下试剂及用量:
。
7.如权利要求6所述的用于检测日本鲭的试剂盒的使用方法,其特征在于:所述实时荧光PCR扩增的条件为:95℃预变性30s;95℃变性5s,60℃退火35s,40个循环。
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