[发明专利]犬轮状病毒单克隆抗体对及其应用

权利要求书

1.一种特异性结合犬轮状病毒的抗体或抗体片段，其中，所述抗体或抗体片段的重链可变区为SEQ.ID No.1或其简并序列所编码，所述抗体或抗体片段的轻链可变区为SEQ.IDNo.2或其简并序列所编码；所述抗体为单克隆抗体、基因工程抗体；其中，所述基因工程抗体包括单链抗体、嵌合单克隆抗体、改形单克隆抗体；所述抗体或所述抗体片段特异性结合犬轮状病毒VP7蛋白。

2.单克隆抗体4A5，其中，所述单克隆抗体4A5的重链可变区为SEQ.ID No.1或其简并序列所编码，其轻链可变区为SEQ.ID No.2或其简并序列所示。

3.一种特异性结合犬轮状病毒的抗体或抗体片段，其中，所述抗体或抗体片段的重链可变区为SEQ.ID No.3或其简并序列所编码，所述抗体或抗体片段的轻链可变区为SEQ.IDNo.4或其简并序列所编码；所述抗体为单克隆抗体、基因工程抗体；其中，所述基因工程抗体包括单链抗体、嵌合单克隆抗体、改形单克隆抗体；所述抗体或所述抗体片段特异性结合犬轮状病毒VP7蛋白。

4.单克隆抗体2C12，其中，所述单克隆抗体2C12的重链可变区为SEQ.ID No.3或其简并序列所编码，其轻链可变区为SEQ.ID No.4或其简并序列所编码。

5.根据权利要求1～4所述抗体或抗体的片段或单克隆抗体的应用，其中，所述应用为表位鉴定研究、犬轮状病毒抗原反应性研究。

6.一种试剂盒，其中，所述试剂盒包括有效量的权利要求2所述的单克隆抗体4A5、有效量的金标记的权利要求4所述的单克隆抗体2C12，以及对犬轮状病毒抗原抗体反应进行检测的检测试剂；或所述试剂盒包括有效量的所述单克隆抗体2C12、有效量的金标记所述单克隆抗体4A5，以及对犬轮状病毒抗原抗体反应进行检测的检测试剂；

优选地，所述试剂盒包括胶体金检测试纸条，所述胶体金检测试纸条包括：底板，所述底板具有第一端和第二端，并且沿所述第一端向第二端的方向上依次有样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜与金标垫接触或与样品垫、金标垫接触使得犬轮状病毒抗原与所述单克隆抗体2C12的结合体能在其上向底板第二端迁移；所述金标垫上含有胶体金标记的所述单克隆抗体2C12，所述硝酸纤维素膜上包括一条检测线和一条质控线，所述检测线上固定化有所述单克隆抗体4A5，所述质控线上固定化有羊抗鼠多抗或羊抗鼠二抗；其中，所述单克隆抗体4A5固定含量为1.0～3.0mg/ml，所述单克隆抗体2C12胶体金标记时浓度为8～32μg/ml，所述羊抗鼠多抗或羊抗鼠二抗含量为1.0～4.0mg/ml。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其中，所述单克隆抗体4A5固定含量为2.0～3.0mg/ml，所述单克隆抗体2C12胶体金标记时浓度为20～28μg/ml，所述羊抗鼠多抗或羊抗鼠二抗含量为2.0～4.0mg/ml，所述金标记单克隆抗体2C12喷量为1.0μl/cm～3.0μl/cm；所述试剂盒还包括样品处理液，所述样品处理液为含1％V/V Triton X-100的磷酸盐缓冲液；

优选地，所述单克隆抗体4A5固定含量为2.0mg/ml，所述单克隆抗体2C12胶体金标记时浓度为24μg/ml，所述羊抗鼠多抗或羊抗鼠二抗含量为2.0mg/ml，所述金标记单克隆抗体2C12喷量为2.0μl/cm～3.0μl/cm；更优选地，所述金标记单克隆抗体2C12喷量为2.0μl/cm。

8.根据权利要求6所述的试剂盒，其中，所述试剂盒中沿所述第一端向第二端的方向上依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫相邻的部件相互接触，而不相邻的部件之间不接触。

9.根据权利要求6～8任一项所述的试剂盒在非免疫诊断目的的应用，其中，所述非免疫诊断目的的应用为流行病学调查、对离体组织进行检测。

10.一种单链抗体，其中，所述单链抗体的重链可变区为SEQ.ID No.1或其简并序列所编码，或所述单链抗体的重链可变区为SEQ.ID No.3或其简并序列所编码，所述单链抗体的轻链可变区为SEQ.ID No.2或其简并序列所编码，或所述单链抗体的重链可变区为SEQ.IDNo.4或其简并序列所编码。