[发明专利]一种产L-乳酸的重组菌及其应用在审
| 申请号： | 202110770111.0 | 申请日： | 2021-07-07 |
| 公开（公告）号： | CN113430127A | 公开（公告）日： | 2021-09-24 |
| 发明（设计）人： | 刘龙;陈坚;吕雪芹;堵国成;李江华;刘延峰;刘甜甜 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12P7/56;C12R1/865 |
| 代理公司： | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人： | 王玉仙 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 乳酸 重组 及其 应用 | ||
1.一种产L-乳酸的重组菌，其特征在于，所述重组菌在酿酒酵母宿主中过表达了D-乳酸脱氢酶Dld1基因，并采用来源于凝结芽孢杆菌的乳酸脱氢酶LDH基因替换丙酮酸脱羧酶基因Pdc1和丙酮酸脱羧酶基因Pdc6，采用来源于可合成L-乳酸的乳酸乳球菌的L乳酸脱氢酶LLDH基因替换乙醇脱氢酶基因Adh1、甘油三磷酸脱氢酶1基因Gpd1或甘油三磷酸脱氢酶2基因Gpd2，敲除酿酒酵母中的转化乳酸为丙酮的L-乳酸氧化还原酶基因Cyb2和羧基转运蛋白基因Jen1。
2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述的酿酒酵母宿主为酿酒酵母MTPfo-4，保藏编号为CCTCC NO:M2020199。
3.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述的D-乳酸脱氢酶DLD1的NCBI基因编号为NM_001180234.1。
4.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述的来源于凝结芽孢杆菌的乳酸脱氢酶LDH的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述的来源于乳酸乳球菌的乳酸脱氢酶LLDH的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
5.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述的丙酮酸脱羧酶PDC1的NCBI基因编号为NM_001181931.1，丙酮酸脱羧酶PDC6的NCBI基因编号为NM_001181216.3。
6.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述的乙醇脱氢酶ADH1的NCBI基因编号为NM_001183340.1，甘油三磷酸脱氢酶1GPD1的NCBI基因编号为NM_001180081.1，甘油三磷酸脱氢酶2GPD2的NCBI基因编号为NM_001183314.1。
7.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述的酿酒酵母中的L-乳酸脱氢酶LLDH的NCBI基因编号为NM_001182412.1，羧基转运蛋白JEN1的NCBI基因编号为NM_001179782.1。
8.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，过表达D-乳酸脱氢酶DLD1基因是通过将TEF1强启动子插入DLD1基因序列前端进行强化表达。
9.权利要求1～8任一项所述的重组菌在发酵生产L-乳酸中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的应用具体是以所述重组菌为发酵菌株，以葡萄糖为底物，发酵生产L-乳酸。
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