[发明专利]CAT在制备肝细胞癌早期诊断试剂盒及制备或筛选抗肝癌药物中的应用

说明书

本发明提供了CAT在制备肝细胞癌诊断试剂盒及制备或筛选抗肝癌药物中的应用，还提供一种CAT分子标志物的检测引物的序列如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。所述肝细胞癌诊断试剂盒包括所述的检测引物。还提供一种抗肝癌药物，包括抑制CAT表达的药物。本发明筛选得到的糖蛋白标志物CAT在不同TNM分期肝癌细胞膜表面表达均高于癌旁组织，其表达随着肝癌恶性程度的增加而增加，可作为肝癌诊断或者预后的标志物；也可为肝癌的治疗提供新的潜在药物靶点。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，特别涉及CAT在制备肝细胞癌早期诊断试剂盒及制备 或筛选抗肝癌药物中的应用。

背景技术

原发性肝癌(Primary Liver Cancer,PLC)是全球第五大常见恶性肿瘤，也是第二大癌 症相关致死性疾病，肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)作为原发性肝癌的主要病 理类型约占70％～85％，其中90％的HCC病人都会经历慢性肝炎-肝纤维化-肝硬化的恶性转 变，肝癌常规筛查策略为血清甲胎蛋白(AFP)检测及肝脏超声影像检查，两者灵敏度和特 异性均不高，由于HCC发病快且缺乏显著特征，超过60％的患者确诊时已进入晚期或发生 转移。目前我国HCC生存预后率仅为12％，然而若患者在早期就得到确诊，五年生存率可 提高到70％以上。

根据美国肝病研究协会(AASLD)，欧洲肝脏研究协会(EASL)以及亚洲太平洋肝脏研究协会(APASL)肝癌指南的综合建议[9]，由中国临床肿瘤学会制订2018年原发性肝癌诊疗指南(CSCO)指出目前临床HCC的常规筛查及诊断策略为血清甲胎蛋白(AFP)水 平检测和肝脏超声影像检查，至少每隔6个月检查一次，必要时进行计算机断层扫描(CT) 扫描和/或核磁共振成像(MRI)扫描并配合肝血管造影(DSA)[10]。但由于以上方法灵敏 度和特异性不高，易使患者失去最佳治疗时机。因此亟待发展新的肝癌标记物辅助HCC早 期预警、疾病分期和治疗预后以提高HCC诊断的准确率。

蛋白质糖基化是一种重要的翻译后修饰，哺乳动物中超过50％的蛋白质具有糖基化修 饰，越来越多研究显示肿瘤中存在异常糖基化修饰及糖苷丰度变化，聚糖不仅可以调节细 胞与细胞、细胞与基质以及细胞与分子之间的相互作用，并参与生物体的许多重要生物学 过程，同时这种糖基化的改变与肿瘤的生长、分化、转化、黏附、转移和免疫监视也密切 相关。目前食品和药物管理局(FDA)批准的大多数非侵入性肿瘤生物标志物都是糖蛋白， 如AFP-L3及CA19-9等已成功应用于临床。除血清、血浆、尿液外，生物体内70～90％的细胞膜蛋白都具有糖基化修饰。因此为了进一步提高HCC早期检测的敏感性及特异性，有必要开发一种新的灵敏度、特异度高的肿瘤标志物。

发明内容

本发明目的是提供CAT作为分子标志物在制备肝细胞癌早期诊断试剂盒中的应用以及 CAT作为靶标在制备或筛选抗肝癌药物中的应用，利用肝细胞癌诊断试剂盒可检测患者膜 蛋白CAT的表达水平，单独检测膜蛋白CAT的表达水平区分肝细胞癌患者和癌旁对照者， 灵敏度达到85％，特异度达到65％；单独检测AFP区分肝细胞癌患者和健康人，灵敏度达 到40％；CAT与AFP联合诊断区分肝细胞癌患者和癌旁对照者，灵敏度达到90％，特异度达到80％。

在本发明的第一方面，提供了CAT作为分子标志物在制备肝细胞癌早期诊断试剂盒中 的应用。

在本发明的第二方面，提供了一种CAT分子标志物的检测引物，所述的引物的序列如 SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。

在本发明的第三方面，提供了一种肝细胞癌早期诊断试剂盒，包括所述的检测引物。

在本发明的第四方面，提供了CAT作为靶标在制备或筛选抗肝癌药物中的应用。

在本发明的第五方面，提供了一种抗肝癌药物，该抗肝癌药物包括抑制CAT表达的药 物。