[发明专利]用于检测COVID-19易感性的分子标记、试剂盒及应用在审
申请号: | 202110698379.8 | 申请日: | 2021-06-23 |
公开(公告)号: | CN113584222A | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
发明(设计)人: | 马丁;吴鹏;丁文成;邬堂春;王超龙;王志杰 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学同济医学院附属同济医院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人: | 胡镇西;程杰 |
地址: | 430030 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 covid 19 感性 分子 标记 试剂盒 应用 | ||
本发明公开了一种用于检测COVID‑19易感性的分子标记、试剂盒及应用,属于分子生物和医学技术领域。该分子标记包括在ABO基因序列的第1007位存在一个SNP位点,其中,脱氧核苷酸由T变为TC。其中,用于COVID‑19早期筛查的试剂盒包括SEQ ID No:2和SEQ ID No:3所示的用于扩增ABO基因的特异性引物;它还包括PCR反应液,所述PCR反应液由Taq酶、Buffer、dNTP、Mg2+和双蒸水组成。本发明设计的分子标记及试剂盒,能实现对于COVID‑19高危人群及易感人群的早期诊断和筛查,对于实现COVID‑19的有效防控具备重要意义。
技术领域
本发明涉及基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)及其与COVID-19的相关性研究,属于分子生物 学和医学技术领域,具体地涉及一种用于检测COVID-19易感性的分 子标记、试剂盒及应用。
背景技术
据数据模型研究和血清感染研究估计实际感染人数要大得多,表 明大多数感染者可能有轻度症状或无症状。COVID-19患者表现出广 泛的临床症状:在确诊病例中,多达5%会发展成为包含急性呼吸窘 迫综合征(ARDS)在内的严重肺炎。虽然目前研究已发现高龄、男性、 高血压、糖尿病、肥胖和心血管疾病等因素与COVID-19的发病密切 相关,但仍有大量没有上述危险因素的患者出现严重症状。提示 COVID-19患者的筛选、早期诊断对于疫情防治具有重要意义,因此, 寻找和鉴定COVID-19高危人群和易感个体至关重要。
然而现有技术中,没有与COVID-19易感性相关的遗传变异的报 道,也没有相关的检测试剂盒和检测方法。因此,本领域急需进一步 寻找COVID-19易感性基因,开发检测COVID-19高危人群和易感个 体的方法、试剂盒以及相关的治疗药物。
发明内容
为解决上述技术问题,本发明公开了一种用于检测COVID-19易 感性的分子标记、试剂盒及应用。具体地通过检测体外样品中是否含 有ABO基因中的单核苷酸多态性,能够实现对于COVID-19高危人 群及易感人群的早期诊断、筛查和对于COVID-19的有效防控。
为实现上述目的,本发明公开了一种用于检测COVID-19易感性 的分子标记,其特征在于:在ABO基因序列的第1007位存在一个 SNP位点,其中,脱氧核苷酸由T变为TC。
本发明公开技术方案的其中一个技术目的是上述分子标记在制 备用于检测COVID-19易感性的试剂盒中的应用。
进一步地,一种用于检测COVID-19易感性的试剂盒,所述试剂 盒包括SEQ ID No:2和SEQ ID No:3所示的用于扩增ABO基因的 特异性引物。
进一步地,所述试剂盒还包括PCR反应液,所述PCR反应液由 Taq酶、Buffer、dNTP、Mg2+和双蒸水组成。
进一步地,所述特异性引物对ABO基因扩增后所得产物长度为 250~2010bp。
本发明公开技术方案的另一个技术目的是一种检测体外样品是 否存在基因单核苷酸多态性的方法,它包括如下检测过程:
采用特异性引物SEQ ID No:2和SEQ ID No:3扩增样品的ABO 基因,得到扩增产物,对所述扩增产物进行序列测定,当ABO基因 序列的第1007位存在一个SNP位点,且脱氧核苷酸由T变为TC时, 则为突变ABO基因,仍是T时为正常基因。
进一步地,采用PCR扩增技术对样品进行扩增,且PCR扩增条 件为,94℃:4分钟,94℃:30秒×35次循环,60℃:30秒×35次循环, 72℃:1分钟×35次循环,72℃延伸5分钟。
进一步地,所述样品包括血液、唾液、肺泡冲洗液等。
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