[发明专利]一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法

说明书

本发明涉及清洁剂技术领域，具体地说是一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法。一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：S1，接种甘油菌；S2，培养甘油菌；S3，甘油菌发酵；S4，诱导甘油菌；S5，催化合成；S6，分离纯化。同现有技术相比，利用诱导甘油菌表达的β‑葡萄糖苷酶催化制备烷基糖苷，保证烷基糖苷纯度的同时提高烷基糖苷的产量，并且利用甘油菌、β‑葡萄糖苷酶的生物方法催化制备烷基糖苷，安全无毒，绿色环保。

技术领域

本发明涉及清洁剂技术领域，具体地说是一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法。

背景技术

烷基糖苷安全无毒，去污力显著，可用作食品级清洁剂。制备烷基糖苷时，常通过单糖、带有各种碳链的醇与水之间的反向水解反应，来生成所需产物。但是受到热力学限制，反向水解反应很快达到热力学平衡，造成烷基糖苷的产量较低。为提高烷基糖苷的产率，促进平衡向正向进行，可提高反应物的浓度或降低水活度。但是反应物浓度过高，会导致反应过程中产生聚糖，降低烷基糖苷纯度。水活度过低，会降低单糖的溶解度，无法保证烷基糖苷产量。

目前工业上采用合烷基糖苷主要采用化学合成法，分为一步法和两步法。一步法为直接糖苷化法，该法是通过将较长链的醇与葡萄糖直接缩合，其对反应条件要求较高。一步法生产的产品回收率较高，为国外工业常用方法，应用十分广泛。一步法必须严格控制温度、催化剂的种类等关键因素，反应过程中需要过量的脂肪醇，分离较为困难。两步法是转糖苷化法，转糖苷法通过较低链的脂肪醇与葡萄糖缩合，产出短链的烷基糖苷。然后将产物再与长链的脂肪醇反应，最后形成长链烷基糖苷。与直接法相比，其相对温和，反应速度也得到提升。但存在产物的分离难，无法将两种烷基糖苷很彻底的分开，工艺繁琐。

因此，设计一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法，保证烷基糖苷纯度的同时提高烷基糖苷的产量。

发明内容

本发明为克服现有技术的不足，提供一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法，利用诱导甘油菌表达的β-葡萄糖苷酶催化制备烷基糖苷，保证烷基糖苷纯度的同时提高烷基糖苷的产量，并且利用甘油菌、β-葡萄糖苷酶的生物方法催化制备烷基糖苷，安全无毒，绿色环保。

为实现上述目的，设计一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

S1，接种甘油菌：取-20℃冷藏的甘油菌，接种在没有杂菌的斜面培养基上，于37℃的恒温下活化2天后，保存在4℃的冰箱内备用；

S2，培养甘油菌：在灭菌的洁净工作台上将步骤S1斜面培养基中的菌种接种于种子培养基中，放入37℃，200r/min的恒温振荡器中培养12h；

S3，甘油菌发酵：在灭菌的洁净工作台上将步骤S2种子培养基中的菌种接种3%于液体发酵培养基中，放入37℃，200r/min的恒温振荡器中培养48h，取发酵液，进行离心过滤，得到的液体部分放入-20℃的冰箱内备用；

S4，诱导甘油菌：在步骤S3的液体部分中加入浓度为2%的乳糖，控制乳糖诱导时机为2h，诱导温度为34℃，培养时间为4天，培养完成后，取发酵液进行离心过滤，得到的沉淀部分用缓冲溶液冲洗，得到β-葡萄糖苷酶，测定酶活性是否满足要求，若酶活性满足要求，则进行步骤S5，若酶活性不满足要求，重复步骤S4；

S5，催化合成：取12-14%葡萄糖、71-73%的脂肪醇、10-15%的水、1.5-2.5%的β-葡萄糖苷酶加入到52℃，150-200r/min的恒温振荡器中，并用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液调节PH=6，反应48-50h；

S6，分离纯化：将步骤S5的反应液过滤除去酶后静置分层，水层与有机层分离后，取有机层减压蒸馏除去脂肪醇，得到粗提取物，再将粗提取物采用膜分离纯化，得到烷基糖苷，即食品级清洁剂。