[发明专利]一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法

权利要求书

1.一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

S1，接种甘油菌：取-20℃冷藏的甘油菌，接种在没有杂菌的斜面培养基上，于37℃的恒温下活化2天后，保存在4℃的冰箱内备用；

S2，培养甘油菌：在灭菌的洁净工作台上将步骤S1斜面培养基中的菌种接种于种子培养基中，放入37℃，200r/min的恒温振荡器中培养12h；

S3，甘油菌发酵：在灭菌的洁净工作台上将步骤S2种子培养基中的菌种接种3%于液体发酵培养基中，放入37℃，200r/min的恒温振荡器中培养48h，取发酵液，进行离心过滤，得到的液体部分放入-20℃的冰箱内备用；

S4，诱导甘油菌：在步骤S3的液体部分中加入浓度为2%的乳糖，控制乳糖诱导时机为2h，诱导温度为34℃，培养时间为4天，培养完成后，取发酵液进行离心过滤，得到的沉淀部分用缓冲溶液冲洗，得到β-葡萄糖苷酶，测定酶活性是否满足要求，若酶活性满足要求，则进行步骤S5，若酶活性不满足要求，重复步骤S4；

S5，催化合成：取12-14%葡萄糖、71-73%的脂肪醇、10-15%的水、1.5-2.5%的β-葡萄糖苷酶加入到52℃，150-200r/min的恒温振荡器中，并用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液调节PH=6，反应48-50h；

S6，分离纯化：将步骤S5的反应液过滤除去酶后静置分层，水层与有机层分离后，取有机层减压蒸馏除去脂肪醇，得到粗提取物，再将粗提取物采用膜分离纯化，得到烷基糖苷，即食品级清洁剂。

2.根据权利要求1所述的一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法，其特征在于：所述的步骤S1中斜面培养基包括如下重量百分比的原料：0.2-0.3%的葡萄糖、0.4-0.6%的酵母浸粉、0.4-0.6%的氯化钠、0.8-1.2%的胰蛋白胨、1-3%的琼脂、0.2-0.3%的K₂HPO₄，94-97%的去离子水，各组分含量之和为100%。

3.根据权利要求1或2所述的一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法，其特征在于：所述的步骤S1中斜面培养基的制备方法具体如下：在空白的培养基中加入所需原料，并在121℃下灭菌20min，灭菌后趁热摆斜面，待斜面冷却固定后放置在37℃下恒温培养2-3天，培养完成后检测是否有杂菌，并放入4℃冰箱待用。

4.根据权利要求1所述的一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法，其特征在于：所述的步骤S2中的种子培养基包括如下重量百分比的原料：0.3-0.5%的葡萄糖、0.5-1.5%的蛋白胨、0.5-1.5%的氯化钠、0.4-0.6%的酵母浸粉，95.9-98.3%的去离子水，各组分含量之和为100%；种子培养基制备完成后在121℃下灭菌20min。

5.根据权利要求1所述的一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法，其特征在于：所述的步骤S3中液体发酵培养基包括如下重量百分比的原料：0.4-0.6%的酵母浸料、0.4-0.6%的Na₂HPO₄、0.4-0.6%的甘油、0.03-0.07%的葡萄糖，98.13-98.77%的去离子水，各组分含量之和为100%。

6.根据权利要求1或5所述的一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法，其特征在于：所述的步骤S3中液体发酵培养基的制备方法具体如下：取0.5%的酵母浸料、0.5%的Na₂HPO₄、0.5%的甘油、0.05%的葡萄糖、98.13-98.77%的去离子水制成液体发酵培养基，并在121℃下灭菌20min，再加0.2%乳糖，搅拌溶解后密封，并在121℃下灭菌20min，并用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液调节PH=7-7.5。

7.根据权利要求1所述的一种含有糖基质发酵物的食品级清洁剂的制备方法，其特征在于：所述的步骤S4中的缓冲溶液为磷酸氢钾溶液或磷酸氢钠溶液。