[发明专利]溶瘤性HSV载体

权利要求书

1.一种重组溶瘤性单纯疱疹病毒(oHSV)，其包含：

(a)呈现在所述oHSV衣壳表面上的非HSV配体，其对癌细胞表面上存在的分子具有特异性；和

(b)插入HSV在正常(非癌性)细胞中复制所需的HSV基因的基因座中的多个拷贝的一种或多种microRNA靶序列。

2.权利要求1所述oHSV，其中所述配体并入暴露在所述HSV表面上的糖蛋白中。

3.权利要求1或2所述oHSV，其中所述病毒包膜蛋白是gD或gC。

4.权利要求1-3任一项所述oHSV，其中所述配体并入gD的残基1和25之间。

5.权利要求1-4任一项所述oHSV，其中所述配体能够特异性结合EGFR或EGFRvIII。

6.权利要求1-5任一项所述oHSV，其中所述配体是结合细胞受体的单链抗体(scFv)或者肽或非肽激素或者生长因子。

7.权利要求1-6任一项所述oHSV，其中所述microRNA靶序列是microRNA的反向互补序列。

8.权利要求1-7任一项所述oHSV，其包含插入所述HSV基因的基因座中的两个或多个(串联的2个、3个、4个、5个或6个)所述microRNA靶序列。

9.权利要求8所述oHSV，其包含插入所述HSV基因的基因座中的4个串联拷贝的所述microRNA靶序列。

10.权利要求8或9所述oHSV，其中所述多拷贝的所述microRNA靶序列通过所述oHSV基因组内的四个或更多个核苷酸的间隔序列相分离。

11.权利要求1-10任一项所述oHSV，其中插入所述microRNA靶序列的所述HSV基因是ICP4。

12.权利要求1-11任一项所述oHSV，其中所述microRNA靶序列插入所述HSV基因的3’非翻译区(3’UTR)。

13.权利要求1-12任一项所述oHSV，其中所述microRNA是miR-124。

14.权利要求1-12任一项所述oHSV，其中所述microRNA是miR-122、miR-124、miR-128、miR-137和/或miR-199，或其两种或多种的组合。

15.一种重组oHSV，其包含

(a)针对癌细胞表面上存在的蛋白具有特异性的非HSV配体，其为特异性结合EGFR或EGFRvIII的scFv，且其插入所述oHSV gD糖蛋白的残基1和25之间，和

(b)插入所述oHSV基因组的ICP4的3’UTR中的4个拷贝的microRNA miR-124的反向互补序列，每个所述拷贝通过8个核苷酸的间隔序列相分离。

16.权利要求1-15任一项所述oHSV，其包含内源重复(接合)区连同所述ICP47基因的启动子的删除，所述重复(接合)区包含一个拷贝的各种二倍体基因ICP0、ICP34.5、LAT和ICP4。

17.权利要求1-16任一项所述oHSV，其进一步包含促进载体通过非经典受体的进入的gB或gH基因突变。

18.权利要求1-17任一项所述oHSV，其进一步包含转基因。

19.权利要求18所述oHSV，其中所述转基因编码溶瘤因子。