[发明专利]一种利用染菌发酵液继续生产红霉素的发酵方法

说明书

本发明是一种利用染菌发酵液继续生产红霉素的发酵方法，该方法是以获得抗性的红色糖多孢菌为生产菌，在染菌发酵液中加入与所述获得的抗性相对应的抗生素。本发明成功的解决了红霉素生产过程中因染菌而灭活处理培养基的问题，有效提高了红霉素发酵工艺技术水平。

技术领域

本发明属于工业微生物的发酵技术领域，具体涉及一种利用染菌发酵液继续生产红霉素的发酵方法。

背景技术

红霉素发酵过程中导致染菌的原因很多，主要有种子带菌、无菌空气带菌、培养基和设备灭菌不彻底、设备死角及渗漏、操作失误和技术管理不善等导致染菌。

生产过程中通常通过生化指标的检查，显微镜观察等进行无菌检测，对发酵设备进行周期性检查和维护，操作过程严格按要求进行等措施防止杂菌的污染。

尽管在发酵过程中各个环节做到了严格的预防，但是染菌事件仍然会发生。对于染菌的发酵液束手无策，直接灭活处理，造成严重的经济损失。

目前，发酵工厂里集中着眼于抗杂菌污染力强的菌种选育，培养基灭菌方法，卫生和现场管理，周期性的检查和维护等防治污染方面，对污染的细菌对发酵的影响没有系统的研究，这在杂菌的污染防治中存在极大的盲目性。

但本申请发明人在实现本申请实施例中发明技术方案的过程中，发现上述技术至少存在如下技术问题：

红霉素的工业发酵中，出现染菌是生产中非常严重的问题，通常灭活处理发酵液，不仅会增加发酵成本，还会影响提炼纯化的收益，导致产品收率偏低，产品质量的下降，造成经济损失。

发明内容

本发明的目的在于解决红霉素生产过程中因污染杂菌，而不能继续发酵的问题，通过向发酵液中流加无菌的庆大霉素水溶液和氨苄青霉素水溶液，杀死杂菌，阻断对生产菌的生长影响。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：

本发明在一些实施方式中，提供了一种利用染菌发酵液继续生产红霉素的发酵方法，以具有抗性的红色糖多孢菌为生产菌，在染菌发酵液中加入与所述抗性相对应的抗生素。

进一步的，所述具有抗性的红色糖多孢菌通过相对应的抗生素抗性筛选方法制备。

进一步的，所述生产菌为具有庆大霉素抗性的红色糖多孢菌，所述抗生素为庆大霉素。

进一步的，所述庆大霉素抑制染菌浓度为3-12μg/ml。

进一步的，所述染菌选自长杆菌、短杆菌和细小杆菌中的至少一种。

进一步的，所述生产菌为具有氨苄青霉素抗性的红色糖多孢菌，所述抗生素为氨苄青霉素。

进一步的，所述氨苄青霉素抑制染菌浓度为3-12μg/ml。

进一步的，所述染菌选自长杆菌、短杆菌和细小杆菌中的至少一种。

一种利用染菌发酵液继续生产红霉素的发酵方法中用到的操作如无特殊说明，均为常规操作。

本发明实验中用到的原材料，试剂，如无特殊说明，均可从正规的供应商购买得到。

本发明实验所用的红霉素生产菌在混有庆大霉素浓度为0-12μg/ml和氨苄青霉素浓度为0-12μg/ml的发酵培养基中可正常生长。

本发明实验中的红霉素发酵罐体积为186m³，发酵液体积130m³，其发酵培养基成分为：淀粉5％，黄豆饼粉8％，糊精3％，(NH₄)₂SO₄ 0.2％，CaCO₃ 0.5％。发酵24h后流加1％正丙醇。

本发明实验中的培养基灭菌使用高压蒸汽灭菌法，温度125℃，时间30min。