[发明专利]一种检测发酵液中庆大霉素含量的方法

权利要求书

1.一种检测发酵液中庆大霉素含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：

a、制备庆大霉素标准溶液和发酵液样品溶液；

b、绘制标准曲线：将庆大霉素标准溶液加水稀释成5个系列浓度的标准工作溶液，各吸取1mL于25mL比色管中，加入茚三酮溶液5mL，沸水浴15-25min，冷却后用水稀释到刻度，在1小时内进行比色；同时用1mL水代替样品进行同步处理，作为空白；以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，进行线性回归，得到庆大霉素的标准曲线和线性回归方程；

c、样品测定与结果计算：吸取1mL样品溶液于25mL比色管中，按照b步骤中标准工作溶液的处理方法进行反应和比色，并将样品的吸光度代入b步骤所得标准曲线，得到样品溶液的浓度；样品溶液的浓度乘以稀释倍数即得发酵液中庆大霉素的含量。

2.根据权利要求1所述的一种检测发酵液中庆大霉素含量的方法，其特征在于：所述庆大霉素发酵液样品溶液的制备方法为：取庆大霉素发酵液，用草酸或盐酸酸化至pH为1.5-2.5，过滤，吸取滤液1-2mL于100mL三角瓶中，加入20mL水，加入离子交换树脂3-5mL，振摇15-30分钟，弃去上清液，用水洗涤树脂3-5次，每次用50mL；然后向树脂中加入稀HCl溶液15mL，振摇解析15-45分钟。解析液用筛网布过滤于25mL容量瓶中，再用稀HCl溶液洗涤树脂2次，每次用4mL，合并洗液与解析液，加NaOH溶液调pH为7.0，再加水定容至刻度，摇匀，作为庆大霉素发酵液样品溶液。

3.根据权利要求1所述的一种检测发酵液中庆大霉素含量的方法，其特征在于：所述庆大霉素标准溶液以水溶解并准确稀释至浓度为1000-3000庆大霉素单位。

4.根据权利要求1所述的一种检测发酵液中庆大霉素含量的方法，其特征在于：所述茚三酮溶液的浓度为2％-10％(g/mL)。

5.根据权利要求1所述的一种检测发酵液中庆大霉素含量的方法，其特征在于：所述检测波长为570nm。

6.根据权利要求1所述的一种检测发酵液中庆大霉素含量的方法，其特征在于：所述庆大霉素样品溶液为庆大霉素发酵液样品溶液。