[发明专利]一种提升长双歧杆菌增殖效率的肽及其应用

说明书

本发明公开了一种提升长双歧杆菌增殖效率的肽及其应用，属于微生物技术领域。本发明为解决因氮源利用率低影响长双歧杆菌增殖的问题，提供了一种提升长双歧杆菌增殖效率的方法，该方法以分子量为1500～2000Da、富含脯氨酸的亲水性肽作为培养基的氮源培养长双歧杆菌。利用该方法培养长双歧杆菌，4g/L氮源培养浓度下发酵液OD₆₀₀高于2.5，为其他氮源的1.8～2.5倍，代时小于2.1h，氮源利用率高于35％。该方法在实现高效促进菌株生长的同时，显著提高氮源利用效率，有效减少氮源的浪费。

技术领域

本发明涉及一种提升长双歧杆菌增殖效率的肽及其应用，本发明属于微生物技术领域。

背景技术

双歧杆菌(Bifidobacteria)是存在于人和动物肠道中的益生菌，是肠道正常菌群之一，同时也是影响消化道生理环境的生理性细菌，目前已确定的双歧杆菌具有抗癌、免疫调节、防止便秘等功效，鉴于其具有上述有效的益生功能，双歧杆菌也越来越成为人们研究、开发、生产的重点，也被逐渐应用到益生菌乳制品生产中。但是目前商业化应用的双歧杆菌菌株种类较少，主要在于双歧杆菌的制备非常困难，氮源是制约其有效增殖的关键因素之一。

目前，国内外对于长双歧杆菌的培养优化，主要是通过单因素试验和正交试验筛选优质的氮源，主要包括酵母浸粉、大豆蛋白胨、胰蛋白胨、鱼骨蛋白胨等多种氮源。但是前期研究发现，即使是具有有效促生长活性的酵母提取物氮源，即使添加0.25％的酵母提取物也不会刺激长双歧杆菌ATCC 15708的生长。此外，这类方法确定的氮源的添加量往往是过量的，生长过程中，培养基中会残留大量未被利用的肽和氨基酸，利用效率低，不仅会提高发酵液的渗透压从而抑制菌株的增殖，也会造成氮源的浪费。

基于现有技术中缺少适用于长双歧杆菌高效增殖的氮源，以提高在长双歧杆菌生长过程中的氮源的利用率，因此，找到一种适宜长双歧杆菌高效增值的氮源对于长双歧杆菌商业化应用变得尤为重要。

发明内容

本发明针对长双歧杆菌培养过程中因氮源利用率低影响长双歧杆菌增殖的问题，提供了一种提升长双歧杆菌增殖效率的方法，所述方法用脯氨酸含量介于16％～20％、分子量介于1500～2000Da的亲水性肽培养长双歧杆菌。

在本发明的一种实施方式中，所述脯氨酸含量介于16％～20％、分子量介于1500～2000Da的亲水性肽作为培养基的氮源。

在本发明的一种实施方式中，所述培养基的成分还含有葡萄糖、无水乙酸钠、KH₂PO₄、K₂HPO₄、MgSO₄·7H₂O、MnSO₄·4H₂O、FeSO₄、柠檬酸氢二铵、吐温、半胱氨酸盐酸盐、CaCl₂、酵母浸出粉、胡萝卜汁。

本发明还提供了一种提升长双歧杆菌氮源利用率的方法，所述方法用脯氨酸含量介于16％～20％、分子量介于1500～2000Da的亲水性肽培养长双歧杆菌。

在本发明的一种实施方式中，所述脯氨酸含量介于16％～20％、分子量介于1500～2000Da的亲水性肽作为培养基的氮源。

在本发明的一种实施方式中，所述培养基的成分还含有葡萄糖、无水乙酸钠、KH₂PO₄、K₂HPO₄、MgSO₄·7H₂O、MnSO₄·4H₂O、FeSO₄、柠檬酸氢二铵、吐温、半胱氨酸盐酸盐、CaCl₂、酵母浸出粉、胡萝卜汁。

本发明还提供了脯氨酸含量介于16％～20％、分子量介于1500～2000Da的亲水性肽的制备方法，具体步骤如下：